2025版药典微生物方法验证与确认

keanvi

各位老师，关于2025版药典新增了微生物方法验证，确认和转移的指导原则。有几个问题想请教下各位大佬呢：
1、使用药典规定的薄膜过滤法或者平皿法做微生物限度的方法，只需要用确认就行的吧
2、方法确认中，需要做专属性，要求是加其他额外的性质相近的菌，这种菌该如何选择呢。

药典原文：

keanvi

药典原文：
确认内容
（1）专属性
确认法定方法时，通常在供试品中添加检测限10倍的目标微生物进行包容性测试，并至少选择1种与特定微生物具有类似特性的菌株进行排他性测试，一般非目标菌的接种量不低于目标微生物接种量的10倍。应根据分析方法检测目标确定排他性测试菌种。如方法检测到属，宜选择相同科内的不同属；如方法检测到种，宜选择相同属内的不同种。此外，如待确认方法以微生物生长信号判断微生物是否存在时，应确认所用培养体系的促生长能力符合规定。
包容性试验结果应能检出全部目标微生物；排他性试验结果不应检出非目标微生物。
（2）准确度
定量试验的准确度可采用回收率评估，回收率应在0.5～2.0之间。也可采用其他适宜的统计方法，待确认方法的准确度应满足相应要求。
（3）精密度
定量试验的精密度可通过考察中间精密度，用估计偏差或重复性标准偏差的方法确认。采用待确认方法，可由不同分析人员或不同试验日期等进行两次测定。每次测定可选择低、中、高3个浓度水平的样品，每个浓度一般测试不少于10次重复。
估计偏差：两次测定结果之间平均值的差值在0.5个lg以内。
重复性标准偏差（Sr）：该评估方法需已知方法的重现性标准偏差（SR），SR一般在方法验证时由实验室间验证获得。按照公式（3）计算，接受限不大于2SR。
博普智库
式中i是测试样品序号，1≤i≤n，n为重复次数，yiA和yiB是两次试验（A人员和B人员，或A日期和B日期等）测试数据的常用对数值。
（4）检测限
在供试品中添加与待确认定性方法的检测限浓度相当的目标微生物进行20次重复测试，同时分别设置空白对照和阳性对照各1组。其中阳性对照污染水平一般大于检测限的10倍。空白对照结果应为未检出，阳性对照结果应为检出，检测限测试组阳性检出比例一般为50%左右。实验室确认的方法检测限一般不超过该方法检测限的3倍；如方法检测限未知，则实验室确认的检测限一般不超过3cfu/测试单元。

咒逐

个人观点吧，这东西是通用方法来的，这些方法在2020版药典中就已经提及，如下是原文：

随着微生物学的迅速发展，制药领域不断引入了一些新的微生物检验技术，大体可分为三类：①基于微生物生长信息的检验技术，如生物发光技术、电化学技术、比浊法等；②直接测定被测介质中活微生物的检验技术，如固相细胞计数法、流式细胞计数法等；③基于微生物细胞所含有特定组成成分的分析技术，如脂肪酸测定技术、核酸扩增技术、基因指纹分析技术等。这些方法与传统检查方法比较，或简便快速，或具有实时或近实时监控的潜力，使生产早期采取纠正措施及监控和指导优良生产成为可能，同时新技术的使用也促进了生产成本降低及检验水平的提高。

也就是说，针对特定样品、法定方法，那么依然是按照方法适用性，也就是1105-1108做就行了。

红烧牛肉面

咒逐 发表于 2025-5-27 14:21
个人观点吧，这东西是通用方法来的，这些方法在2020版药典中就已经提及，如下是原文：

我觉得吧，这种东西有方法的还是做一做方法学为好
凡是写的经评估的，一遇到监管就会被挑战，他们就会不停的问你们到底怎么评估？你们评估的依据是什么？有什么证据？理由充分吗？
所以我个人觉得该做就做一下，以事实数据说话。让他们闭嘴

咒逐

红烧牛肉面 发表于 2025-5-27 14:37
我觉得吧，这种东西有方法的还是做一做方法学为好
凡是写的经评估的，一遇到监管就会被挑战，他们就会不 ...

这个评估不是自己写的，实验室和分析人员指的是9203的要求。