含有大黄的栓剂如何去除抑菌性

enjoy7711

我是新来论坛的，对微生物检验也不是很有经验，所以特地来这里咨询大家。
请问一下，含有大黄成分的中药栓剂，有抑菌性，在做适用性试验时，用什么方法可以去除供试液的抑菌性，以前，我们是用离心沉淀法加薄膜过滤法，但新版药典好象取消了离心了。我试过培养基稀释法，0.2ml每皿的，只有枯草不抑。
请问大家有对此了解的吗？谢谢。

enjoy7711

还有，附加问一下，如果做培养基稀释法，适用性试验计数用0.2ml每皿时，供试液组和菌液组的每个菌是不是一定要做满10个平板，总计2毫升，一起计总数的？

可亲可爱

可否在培养剂中加中和剂，破坏抑菌性。

enjoy7711

可否在培养剂中加中和剂，破坏抑菌性。[/quote]
是在大豆胨琼脂中加入中和剂吗？什么中和剂呢？供试液中加有6ml的吐温80了。

lyfeiye

制备供试液的时候加入有效的中和剂，你加的吐温80不见得是有效的中和剂

enjoy7711

制备供试液的时候加入有效的中和剂，你加的吐温80不见得是有效的中和剂[/quote]
我准备在配制蛋白胨时加入卵磷脂，再来制备供试液，不知是否有效。

lyfeiye

我准备在配制蛋白胨时加入卵磷脂，再来制备供试液，不知是否有效。[/quote]
可以的，不过不见得有效，你可以多试试不同的中和剂

enjoy7711

可以的，不过不见得有效，你可以多试试不同的中和剂[/quote]
请问，还有什么中和剂呢？我们只用过卵磷脂。
我昨天做了金葡和铜绿菌，1ml,0.2ml,0.5ml,10-2的，今天好象没见长，菌液组已长了。还有什么别的方法吗？
还有请问一下，比如我做0.2ml的培养基稀释法，是不是试验组一定要做10个平板的？包括供试品对照组和菌液组也是10个？

lyfeiye

请问，还有什么中和剂呢？我们只用过卵磷脂。
我昨天做了金葡和铜绿菌，1ml,0.2ml,0.5ml,10-2的，今天好 ...[/quote]
我们没有这个品种，具体的什么中和剂我也推荐不了。你可以增加稀释倍数，10g到400ml甚至更多，混匀后，静置一会儿，取清液做薄膜过滤不知道可不可行？

enjoy7711

我们没有这个品种，具体的什么中和剂我也推荐不了。你可以增加稀释倍数，10g到400ml甚至更多，混匀后，静 ...[/quote]
比如我做0.2ml的培养基稀释法，是不是试验组一定要做10个平板的？包括供试品对照组和菌液组也是10个？

enjoy7711

我们没有这个品种，具体的什么中和剂我也推荐不了。你可以增加稀释倍数，10g到400ml甚至更多，混匀后，静 ...[/quote]
薄膜过滤法，膜那么小，要长不大于100个菌，能数得清楚吗？

lyfeiye

enjoy7711 发表于 2016-1-6 10:17
比如我做0.2ml的培养基稀释法，是不是试验组一定要做10个平板的？包括供试品对照组和菌液组也是10个？

你做的1:10的供试液，0.2ml每皿的话做5个

lyfeiye

enjoy7711 发表于 2016-1-6 10:18
薄膜过滤法，膜那么小，要长不大于100个菌，能数得清楚吗？

控制好菌落数＜100CFU，肯定数得清的

enjoy7711

拜托，请问还有谁对此有了解的吗？我没有办法呀。一个新人，还要一个人做这个栓剂验证。用什么方法呀？

爱飞de鱼

试着分析一下大黄的成分。
因为我不是做中药的，只能百度，不知它的解释是否全面：大黄含大黄酚、大黄酸、芦荟大黄素等蒽醌类约30%，鞣质约5%。
从成分上看，大黄应该是一种复方抑菌剂，如果要采用中和剂，推荐：聚山梨脂80+卵磷脂+硫代硫酸钠。
另外，不知能否用过滤+稀释达到去除抑菌的目的。
可以都试一下，因为没做过，仅供参考。

enjoy7711

爱飞de鱼 发表于 2016-6-16 15:30
试着分析一下大黄的成分。
因为我不是做中药的，只能百度，不知它的解释是否全面：大黄含大黄酚、大黄酸、 ...

谢谢呀，我们的后来是加了0.3%的卵磷脂。聚山梨脂80也加的，但它是乳化剂，供试液里加了，不能算是中和剂吧？

爱飞de鱼

enjoy7711 发表于 2016-8-3 15:14
谢谢呀，我们的后来是加了0.3%的卵磷脂。聚山梨脂80也加的，但它是乳化剂，供试液里加了，不能算是中和剂 ...

其实中和剂只是一种笼统的叫法，试剂起的作用可能存在多种，不论如何，最后达到消除抑菌活性即可。