菌种传代

90园子

药典规定菌种传代不得超过5代，我们平时是从冻干粉为0代，开始传，至第五代，TSA(或SDA)斜面保存，第一代不用，传代后直接灭菌，每次做样制成菌液，有培训老师说我们的做法是错误的，说菌液也算一代，第五代就传了，或者第五代不用，配成菌液了就是第六代，不知道对不对？

lch

如果制成菌液时存在培养增殖过程，确实是算一代的。这种情况下斜面只能传到四代，或者是像黑曲霉一样用洗脱的办法

几多知己

这样风险很大啊，可能会被毙掉哦

大草原制药人

lch 发表于 2017-3-27 11:33
如果制成菌液时存在培养增殖过程，确实是算一代的。这种情况下斜面只能传到四代，或者是像黑曲霉一样用洗脱 ...

正确。

利不害，为不争

还要稳托点好

凉风

一般二代作为传代菌种冷冻保存，使用保存的三代及四代就好，没必要传代至第五代，只要第二代冷冻保存的多点，应该是够用的，每次传代多传几支就行了！

90园子

凉风 发表于 2017-3-27 14:39
一般二代作为传代菌种冷冻保存，使用保存的三代及四代就好，没必要传代至第五代，只要第二代冷冻保存的多点 ...

我们传的有效期都是一个月，冰箱2-8℃保存

90园子

lch 发表于 2017-3-27 11:33
如果制成菌液时存在培养增殖过程，确实是算一代的。这种情况下斜面只能传到四代，或者是像黑曲霉一样用洗脱 ...

都是前面的人说第一代不用，传五代，没有人解释为什么都不知道菌液就算是一代

applecircle

每次亚转种就算一代

applecircle

90园子 发表于 2017-3-27 19:40
我们传的有效期都是一个月，冰箱2-8℃保存

赞同你的观点

凉风

90园子 发表于 2017-3-27 19:40
我们传的有效期都是一个月，冰箱2-8℃保存

简单点说，0代回来，平板复苏（1代），然后挑选好的菌落做一管菌液和几支斜面（2代），其中菌液做冷冻保存（-23或-30或-80等），我用的是甘油保存！然后剩下几支斜面，2-8摄氏度保存及使用（其中一支作为传代），一个月后将传代菌种传代做斜面（3代），根据使用量，多传代几支，其中一支作为传代菌种，待一个月后使用三代的传代斜面再次传代做斜面（4代），全部作为工作菌种，在坚持一个月！之后就可以拿取冻存管，然后传代斜面（3代），继续使用！！！！这样，一般2-8里面的菌种不会有第五代，也就是不存在使用过程中制备菌液是否会超出代数的问题！而且一支0代，做好冷冻保存，可以用2-3年！

冷酷仙境87

通俗的说，只要转入不同容器并经过培养过程就是一代了

90园子

凉风 发表于 2017-3-28 08:55
简单点说，0代回来，平板复苏（1代），然后挑选好的菌落做一管菌液和几支斜面（2代），其中菌液做冷冻保 ...

0代买回来2-8℃可以保存多久呢？

凉风

90园子 发表于 2017-4-13 13:18
0代买回来2-8℃可以保存多久呢？

买回来的盒子上面有保存时间吧，好像三五年，忘了！

90园子

凉风 发表于 2017-4-13 13:54
买回来的盒子上面有保存时间吧，好像三五年，忘了！

那个不是冷冻保存吗

凉风

90园子 发表于 2017-4-13 13:54
那个不是冷冻保存吗

你传代以后再做冷冻保存啊！买回来的0代未传代（也就是不使用的）可以保存三五年，这个看你买的0代的包装！你不是问0代买回来放多久么？

90园子

凉风 发表于 2017-4-13 13:57
你传代以后再做冷冻保存啊！买回来的0代未传代（也就是不使用的）可以保存三五年，这个看你买的0代的包装 ...

是呀，因为目前还用不到其他的菌种，0代又买回来了，就想着先不传代，我们是2-8℃冰箱保存，不知道能放多久

dk521

90园子 发表于 2017-4-13 13:18
0代买回来2-8℃可以保存多久呢？

按 说明书上的 储存条件 和 有效期

dk521

90园子 发表于 2017-4-13 13:18
0代买回来2-8℃可以保存多久呢？

按 说明书上的 储存条件 和 有效期