不锈钢模具清洗方法的内毒素挑战如何做？

pisso

各位老师好！
    公司用于盛放蛋白溶液进行冻干的容器是不锈钢模具，由于冻干产品是植入类医械，因此需要对不锈钢模具进行去热原，由于种种原因，领导将原来的干热除热原改为使用氢氧化钠清洗去热原。在这个地方本人认为应该进行一个内毒素挑战试验，证明内毒素可以降低3log才能证明此清洗工艺（将所有模具放置于氢氧化钠溶液中浸泡）有效。
    我有以下问题：如何制备和处理阳性样品？以及如何取样？
    原设计是将干热灭菌指示剂的内毒素标准品（即一个安瓿瓶里面装有吸附在瓶壁上的内毒素干品）开口后置于氢氧化钠溶液中一起浸泡。浸泡完毕之后用注射用水冲洗PH至中性，然后再用震荡洗脱内毒素稀释后用于凝胶法检测。
    此设计经讨论后漏洞重重（最致命的一个，氢氧化钠试剂用量近90L再经过冲洗，内毒素可能是由于被稀释后才检测不出，如果全部模具都达到这个内毒素浓度又不太可能，90L溶液得加入多少eu内毒素呀），所以上论坛请教各位老师我的清洗方法的内毒素挑战要如何进行比较合理？

叶非

恭喜你找到用NaOH去热源的根本原因了。目前实际上没有科学的方法，来证明NaOH是可以去除内毒素的，因为你无法证明到底去除内毒素是因为NaOH，还是因为清洗。但是，如果你把加入NaOH当成是你的清洁程序的一部分就没有问题了，因为你是证明你的清洁程序的有效性，而不是某种物质的去除效果。

pisso

uiofer 发表于 2017-8-28 17:19
恭喜你找到用NaOH去热源的根本原因了。目前实际上没有科学的方法，来证明NaOH是可以去除内毒素的，因为你无 ...

uiofer老师您好！
   很激动老师能来回答我的问题！事实上我对这个去热原的理解很大部分是基于您在其他帖子的留言！
   可能我表述的不是很清楚或者我已经陷入了牛角尖！我其实明白证明我的清洁程序的有效性才是验证的关键，我能想到用来证明清洁程序的有效性就是内毒素挑战，但是在实操过程中，我没有办法做到。（没有办法做到的原因就是：如果只在几个模具接入1000eu内毒素则没有办法证明这些内毒素是否被稀释掉了，那所有模具都是脏的话，同样那么多试剂是否能同样稀释到合格的程度。如果所有模具都接入1000eu的话成本太高，一支安度斯1250eu的内毒素要45元，我一池子几百个模具。。）

M.dufresne

为何在验证前不风险评估？任何脱离实际的验证都是耍流氓

wwd7212

实际上你如果用干热去热源 ，自然是最好的。现在的问题是你是使用氢氧化钠溶液冲洗的效果是不容易模拟，你如果要做的话，应该是按照正常的清洁方式模拟一个较小的不锈钢容器 进行，当清洁完成后，你使用无热源水再次冲洗，你可以对最后的洗涤水进行检测，如果真的测不到的话， 可以认为这种方法还是有效的