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[小容量] 支原体培养为什么要用半流体培养基

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药徒
发表于 2020-3-3 18:32:20 | 显示全部楼层 |阅读模式

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请问各位老师,药典中支原体培养法需要用到液体培养基,为什么还要用到半流体培养基?为什么半流体培养基中还不能加酚红?支原体在液体和半流体培养基中的反应现象不一样么?因为之前没做过这方面的实验,所以搞不清楚怎么回事,请各位老师指教。
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大师
发表于 2020-3-4 08:37:05 | 显示全部楼层
本帖最后由 LanBo 于 2020-3-4 08:40 编辑

蒲友提供以下参考:第一、用液体培养基加酚红是一个初步的判断,因为支原体在液体中的生长我们看到是澄清的状态,反应在颜色的变化上,由黄色变为红色,但是如果这个过程有其他因素干扰的会就会判断不准确,所以要进行第二步固体或半固体培养。用固体或半固体培养基培养出来可以看到菌落的形态准确地判断,加酚红会有颜色会掩饰原本的菌落形态。半固体或固体是有明显的菌落形态,液体是澄清的状态。第二、液体培养基中的酚红是用来作为变色指示剂的,支原体生长后会导致pH值的变化,用作变色单位的判断,固体或者半流体培养基用来观察生长状态。

点评

1,液体培养基:颜色应该是有红色变成橙色再变黄色,橙色如果是自己接种最好,如果变成黄色支原体基本也就废了。 2,液体培养基只是为了方便观察,不能做为判断依据,主要看琼脂平板或者半流体生长情况,综合判断..   发表于 2022-7-4 14:05
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药徒
 楼主| 发表于 2020-3-4 09:03:47 | 显示全部楼层
LanBo 发表于 2020-3-4 08:37
蒲友提供以下参考:第一、用液体培养基加酚红是一个初步的判断,因为支原体在液体中的生长我们看到是澄清的 ...

非常感谢老师,受益匪浅
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药徒
发表于 2021-2-22 17:35:09 | 显示全部楼层
培养法会不会太慢,PCR法做替代是否有考虑过?
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药徒
 楼主| 发表于 2021-4-29 08:16:58 | 显示全部楼层
工作QQ 发表于 2021-2-22 17:35
培养法会不会太慢,PCR法做替代是否有考虑过?

您说的对,培养法确实是很慢。不管用什么别的方法,培养法都是要做的,不知我的理解是否正确。
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药徒
发表于 2021-5-28 09:07:50 | 显示全部楼层
请问药典在培养法中规定的培养7天后将液体培养基还要次代接种到液体培养基,这是什么原因呢?

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同问,请问有得到答案吗  详情 回复 发表于 2022-7-4 08:17
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药徒
发表于 2022-7-4 08:17:35 | 显示全部楼层
dongqisheng 发表于 2021-5-28 09:07
请问药典在培养法中规定的培养7天后将液体培养基还要次代接种到液体培养基,这是什么原因呢?

同问,请问有得到答案吗
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药徒
发表于 2022-7-4 14:19:38 | 显示全部楼层
younx 发表于 2022-7-4 08:17
同问,请问有得到答案吗

你所说的应该是3301里,做培养基灵敏度实验,需要盲传两代,它的逻辑应该在于ATCC零代标准支原体比较难复苏,驯化之后就比较好养活。 至于为何要用半流体,不过就是为了拟补液体培养基的缺陷,两者相辅相成,提高实验准确率而已
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药圣
发表于 2023-4-26 19:41:28 | 显示全部楼层
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发表于 2023-5-11 15:53:02 | 显示全部楼层
指示细胞培养法中细胞培养物至少传代一次是要把细胞消化下来吗,那传代的密度又是什么?
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