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[检验及监测] 脂质体测细菌内毒素方法

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目前遇到脂质体测内毒素,其主要成分是磷脂和胆固醇具有亲水性和疏水性两种性质,且带正电荷,会吸附内毒素,尝试使用内毒素分散剂稀释至一定倍数,发现有增强作用。目前想用超声的方法,破坏脂质结构,分散内毒素,各位大神有没有更好的建议
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大师
发表于 3 小时前 | 显示全部楼层
以下是一些可以考虑的方法来处理脂质体测内毒素问题:

化学处理方法

添加表面活性剂:选择合适的非离子型表面活性剂,如吐温 - 80等。这些表面活性剂能够包裹脂质体和内毒素,阻止它们之间的吸附作用,并且有助于将内毒素分散在溶液中。不过需要注意的是,表面活性剂本身可能会对检测体系产生一定的干扰,所以要先进行预实验确定合适的浓度范围。
改变缓冲液成分:尝试不同的缓冲液,例如含有乙二胺四乙酸(EDTA)的缓冲液。EDTA可以螯合一些金属离子,而金属离子有时会促进脂质体和内毒素之间的相互作用。通过螯合金属离子,可能会减少吸附,从而使内毒素更好地分散。

物理处理方法

反复冻融循环:除了超声,反复冻融也是一种破坏脂质体结构的物理方法。将样品在低温(如 - 80℃)和室温之间反复循环多次,使脂质体由于冰晶的形成和融化而破裂,释放内毒素。这种方法相对温和,不会像超声那样可能产生局部过热等问题。
高压均质处理:在适当的压力下,使样品通过狭小的通道,利用剪切力和压力变化来破坏脂质体结构,从而使内毒素分散。在操作过程中要注意压力和循环次数的优化,避免过度处理导致样品性质改变。
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