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[检验原理]:革兰氏阳性菌的细胞壁有一层比革兰氏阴性菌厚的肽聚糖,能与结晶紫紧密结合,不容易被脱色液洗掉,在此基础上形成了革兰氏染色液试剂。
[主要组成成分]:结晶紫溶液、碳酸钠溶液、碱性碘液、丙酮酒精溶液、碱性复红溶液
[样本要求]:待检标本应为菌株或有菌株的标本。
[检验方法]:
1.将标本均匀涂布于洁净玻片上,自然干燥,火焰固定。
2.待冷却后滴加结晶紫溶液、碳酸钠溶液各2滴,初染30秒后水洗。
3.然后用碱性碘液媒染30秒,水洗后用丙酮酒精溶液脱色至无蓝色脱落为止,水洗。
4.用碱性复红复染5秒,水洗、晾干、镜检。
[检验结果解释]:
在显微镜下观察染色结果:
A在显微镜下观察到紫色或深紫蓝色菌落为革兰氏染色阳性菌。
B在显微镜下观察到红色或粉红色菌落为革兰氏染色阴性菌。
[检验方法的局限性]:
有些细菌有染色嗜变性,不一定完全是染色原因,应根据菌体形态加以确定。
[注意事项]:
1.该染色液仅用于体外诊断。
2.涂片厚薄要均匀,自然干燥后再加热固定。
3.复染的时间不能太长,这样很容易将阳性菌染成阴性菌。
4.所用标本应视为具有传染性物质。
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