解决痛点的方法：

1、合理设计的大肠杆菌菌株:选择适当的君主作为宿主，可以大大减少杂质，菌株基因型：endA（核酸内切酶）、recA突变（预防外源基因重组）。针对不稳定质粒选用K12系及B系杂交菌株Stbl3，具有较高的质粒生产稳定性。论述Stbl3的基因型特性(endA+)，论述B系菌株与K12菌株的区别。

2、新的发酵策略：补料方式、罐温控制、比生长速率控制。

3、改进的培养基配方：（组分、C/N比例、微量元素）

4、优化的质粒骨架:对于拷贝数，一般选用来自于ColE1(PBR322)高拷贝ori,启动子区携带抗性基因用于细胞库构建；对于质粒稳定性：（在某些情况下，不稳定性被观察到与多重复序列、富含AT序列、非标准二级结构（弯曲、十字形、三螺旋、碱基翻转）、长末端序列）