大家在做液相时，遇到这样的情况，该不该出手?

kangabc · 发表于 2014-4-11 22:15:50

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1,本人最近在做一个药材（桑叶）的含量测定，
2,药典的方法是用甲醇和0.5%磷酸溶液走梯度，共用时间18分钟
3，走完梯度，我设置了20分钟的时间回到初始比例，即共是38分钟。
3,问题来了，主峰竟然在规定的梯度时间之后才出峰（即18分钟之后，大概19分钟）。
4,做出来的峰形还好，但是，我该出手么搞搞么，你们遇到家样的问题是怎么处理的，换柱吗？调整梯度？升高柱温？
附：

桑叶含量测定：
照高效液相色谱法[《中国药典》2010年版一部附录Ⅵ D(P附录36)]测定
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷鍵合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.5%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为358nm。理论板数按芦丁峰计算应不低于5000。
时间(分钟) 流动相A(%)       流动相B(%)
0～5             30            70
5～10       30→35                   70→65
10～15          35→40                   65→60
15～18    40→50                   60→50

静夜思雨 · 发表于 2014-4-11 22:47:27

没问题的.

咕咕 · 发表于 2014-4-11 22:53:21

没问题，比例可调。

可亲可爱 · 发表于 2014-4-11 23:32:10

不要以为这里到18分钟就是整个过程就结束了，需要在A与B流动相以50%的比例恒流再运行一段时间的。

囧囧 · 发表于 2014-4-12 15:59:13

小弟愚见，要么调整时间，要么调整比例~我们是这么干的。

paynelee · 发表于 2014-4-14 15:33:41

本帖最后由 paynelee 于 2014-4-14 15:49 编辑

我的建议是换根柱子，你出峰都在梯度时间之外了，说明你这个柱子并不适合这个方法……
方法的耐用性考察通常不会包含所有品牌的色谱柱，而中国药典只会说C18
虽说流动相比例可调，柱温可调，但我的建议是尽量不要去改方法，遇到深究的专家麻烦
咨询下别的企业这个品种用的是什么柱子吧

paynelee · 发表于 2014-4-14 15:41:54

本帖最后由 paynelee 于 2014-4-14 15:43 编辑

刚才帮你查过了，自己看吧，这个柱子应该每个实验室都有……
05版的色谱集是安捷伦做的，所以用的都是安捷伦的柱子

hongwei2000 · 发表于 2014-4-15 10:19:50

中国药典最缺德的地方之一就是没有规定柱子的品牌填料和规格
要知道这是方法重现性的最关键的信息
所以没办法你最好和做过的人咨询一下柱子信息
否则你还得一个一个试

kangabc · 发表于 2014-4-15 23:31:08

paynelee 发表于 2014-4-14 15:41
刚才帮你查过了，自己看吧，这个柱子应该每个实验室都有……
05版的色谱集是安捷伦做的，所以用的都是安捷 ...

图谱不错，

cpulyx · 发表于 2014-4-17 15:12:24

{:soso_e113:}不错的建议

sailiang66 · 发表于 2014-4-17 16:05:46

《中国药典》是国家法典，不好具体指明某品牌，让人怀疑收钱做广告哦

咸长发 · 发表于 2014-4-18 17:12:32

hongwei2000 发表于 2014-4-15 10:19
中国药典最缺德的地方之一就是没有规定柱子的品牌填料和规格
要知道这是方法重现性的最关键的信息
所以没 ...

说的太对！！国外标准都有柱子的品牌填料和规格

ASCENT · 发表于 2018-1-24 08:22:45

Thank you guys for sharing the information.

小金库 · 发表于 2022-7-24 19:01:33

看一下，谢谢分享