关于微生物检查用的滤膜的几个问题，求解答！

听雨轩 · 发表于 2014-7-8 16:25:19

膜过滤法所用的0.45微米滤膜的灭菌方法可以用脉动蒸汽灭菌，微生物的技术方法验证时已经包含了滤膜的因素。

chenqi · 发表于 2014-7-8 17:50:21

andyouandme 发表于 2014-7-7 22:59
供应商怎么说

没有向供应商问过这个问题

chenqi · 发表于 2014-7-8 17:51:39

君瀹发表于 2014-7-8 08:11
我们当时就是将滤膜放在烧杯中，注入适量的纯化水或者注射水，用铝箔封口进行湿热灭菌。使用时再开封，一 ...

貌似是个很好的方法啊，你们现在也是直接买无菌的滤膜了吗?

chenqi · 发表于 2014-7-8 17:54:11

听雨轩发表于 2014-7-8 16:25
膜过滤法所用的0.45微米滤膜的灭菌方法可以用脉动蒸汽灭菌，微生物的技术方法验证时已经包含了滤膜的因素。

有理

andyouandme · 发表于 2014-7-8 18:12:53

关注一下啊。。。。。。。。。。。。。。

君瀹 · 发表于 2014-7-9 07:52:44

chenqi 发表于 2014-7-8 17:51
貌似是个很好的方法啊，你们现在也是直接买无菌的滤膜了吗?

不是的，一直就是买的普通滤膜，然后自己进行灭菌的，这样自己心里有谱。灭菌效果也好验证啊。

cinedly · 发表于 2014-7-9 08:22:20

曾近我做的时候是用一层半透明的蜡光纸包好，外部再用铝箔或锡纸包一层，高压锅121℃30分钟湿热灭菌，结束后若是湿的则还要放在烘箱里40℃左右烘干。

歪说歪有李 · 发表于 2014-7-9 09:16:34

本帖最后由 vabs 于 2014-7-9 09:18 编辑

自己湿热灭菌是否会改变膜的通透性或孔径，这个必须按厂家说明进行，可以选用经Co60灭菌的膜或环氧乙烷灭菌的膜
还有，这个膜你做回收率的方法不太对，建议使用《药品检验标准操作规范》2010版里面，无菌检查法里面的方法，有三种可选
一般建立在对供应商的审计和检查供应商的COA

好像做这个的不多

lxiaof · 发表于 2014-7-9 09:59:16

滤膜可以使用湿热灭菌法灭菌，通常的做法是泡在稀释液中灭菌，可以使用平皿做灭菌容器，使用起来很方便。
方法验证，是做培养基适用性时做的，只要回收率超过70％。
用直接接种法和薄膜过滤法直接比较菌落数做回收率不是很合适，滤膜的面积和平皿的面积差别很大，菌落是由许多微生物生成物集合而成。面积会不会对菌落数有影响，还需要进一步的实验证明。两种不同的生长环境，只要菌落数超过50，滤膜上的菌落数很难数清，需要分片计数，而平皿上的菌落数在300以内都可以直接计数，计数方法的不同，对菌落数也会带来影响。两种方法的计数只要在同等数量级以内，应对实验结果无大的差别。如果想做很严谨的验证，还需要很有资质的供应商的技术支持，药厂自身做这个验证还是有难度的。

chenqi · 发表于 2014-7-9 17:52:10

lxiaof 发表于 2014-7-9 09:59
滤膜可以使用湿热灭菌法灭菌，通常的做法是泡在稀释液中灭菌，可以使用平皿做灭菌容器，使用起来很方便。
...

谢谢，感觉你说的还是有道理的，根据你说的，是否只要将菌数控制在50左右就可以比较了呢？

chenqi · 发表于 2014-7-9 18:25:02

vabs 发表于 2014-7-9 09:16
自己湿热灭菌是否会改变膜的通透性或孔径，这个必须按厂家说明进行，可以选用经Co60灭菌的膜或环氧乙烷灭菌 ...

我看了中国药品检验标准操作规程，没发现你说的三种方法，能不能具体说说是第几页啊，万分感谢

chenqi · 发表于 2014-7-9 18:26:20

cinedly 发表于 2014-7-9 08:22
曾近我做的时候是用一层半透明的蜡光纸包好，外部再用铝箔或锡纸包一层，高压锅121℃30分钟湿热灭菌，结束后 ...

这个用起来相对麻烦了点，还要烘箱烘干。。。

1134577006 · 发表于 2014-7-10 11:06:04

我们是将过滤装置装好了在进行蒸汽灭菌后使用的

chenqi · 发表于 2014-7-10 18:14:08

1134577006 发表于 2014-7-10 11:06
我们是将过滤装置装好了在进行蒸汽灭菌后使用的

装好之后灭菌，灭完之后那个滤膜会中间凸起，这个方法我也试过，好像不是很理想，才没有用

zpzjm2010 · 发表于 2014-7-11 20:49:17

光头强发表于 2014-7-7 18:50
蒸汽灭菌，做微生物实验一般请第三方，企业做风险很大，我们就是请的第三方

同意楼主说法，省事。

lxiaof · 发表于 2014-7-14 16:24:45

chenqi 发表于 2014-7-9 17:52
谢谢，感觉你说的还是有道理的，根据你说的，是否只要将菌数控制在50左右就可以比较了呢？

菌落计数法使用不同的容器计数都会有偏差，这个很难说可不可以比较，还需要专业技术人员评估。我感觉即使可以比较，实验误差也会很大，回收率达到70%有一定困难。

chenqi · 发表于 2014-7-14 17:51:03

lxiaof 发表于 2014-7-14 16:24
菌落计数法使用不同的容器计数都会有偏差，这个很难说可不可以比较，还需要专业技术人员评估。我感觉即使 ...

如果这个回收率达到70%都有困难，那么请教一下你们的产品，如果用薄膜过滤法的时候回收率是怎么达到70%的呢？要知道，在产品验证的时候就已经包括了这个过程了啊

lxiaof · 发表于 2014-7-15 09:28:37

chenqi 发表于 2014-7-14 17:51
如果这个回收率达到70%都有困难，那么请教一下你们的产品，如果用薄膜过滤法的时候回收率是怎么达到70%的 ...

薄膜过滤法回收率是比较同种检测方法的回收率，自然可以达到。比较直接接种法和薄膜过滤法之间两种方法的回收率，我没有做过，只是感觉达到70%困难。

chenqi · 发表于 2014-7-15 18:14:52

lxiaof 发表于 2014-7-15 09:28
薄膜过滤法回收率是比较同种检测方法的回收率，自然可以达到。比较直接接种法和薄膜过滤法之间两种方法的 ...

不会吧，你的意思是你们薄膜过滤法的菌液组也是用薄膜过滤的吗？如果真是这样，那可能就要出大事了哦。。。

[检验及监测] 关于微生物检查用的滤膜的几个问题，求解答！

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