【HPLC异常问题及解决】异常2：没有泵流速

北重楼

和昨天的异常1：不出峰以及峰面积非常小的现象很类似，对于没有泵流速的情况表现出的图谱形态与不出峰很类似，典型的图谱是上图中的一根直直的基线。没有泵流速自然就没有成份的洗脱，而且由于没有流动相经过检测器的流通池，基线自然也是没有信号的一条直线。


对于没有泵流速的情况，自然而然会想到是泵出了问题，如果泵被关掉的话，需要把泵打开。泵没有开的情况应该还是很好判断的，熟悉HPLC的朋友对于泵正常工作时的声音应该都有所感觉，同时观察的话可以发现溶液输送管路里的流动相是静止，同时废液管路中也没有流动相的排出。

还有一种可能是泵在工作，但是流路被阻塞，指南中举的例子（流动相的瓶子已经排空）或许不大恰当。但是指南里提供了一个有用的思路，对于HPLC的问题排查而言，往往需要回到系统的模块图中，顺着各模块的顺序逐一排查。对于流动相而言，不恰当的混合以及没有必要的脱气可能导致流动泵的下游流动泵或样品环处产生气阻，同时样品环的阻塞也会导致没有流速（不过这种情况通常也会伴随着压力的骤然增加）。

导致没有流速还有一个重要的原因是系统的漏液，不过笔者认为一般的漏液并不会导致完全的没有流速，往往会导致系统的压力偏低，这一点将在明天的解说中详细分析。

最后一个泵没有流速的原因往往在于发生在泵头的气阻，指南中也花了很大的篇幅讲如何处理，处理方法如下：将泵的下游（保护柱的进口或者分析柱的进口）拆开，采用大的流速（5－10ml/mini）冲洗泵头，这里需要强调的是，如果有多通道的泵的话，需要对每个通道进行冲洗，必要时需要将泵的排空阀门打开，以便于阻塞的气体排出。如果问题还是存在，指南建议用100%的甲醇或异丙醇进行系统流路的冲洗，从这两种溶剂来看都是极性较强的溶剂。

通常情况下，采用极性溶剂进行冲洗后，问题就可以解决，但如果问题还是持续，指南的建议是联系供应商，笔者没遇到过这样的情况，不过从逻辑上分析，可能是电路系统内部的逻辑故障，不知有没有遇到过的朋友，可以留言。

最后，附上一张溶剂极性的图，里面的一些数据还是很有参考价值的，比如说截止波长的数据以及是否可以与水混溶的数据。

极性的C18柱与非极性的柱子往往针对不同类型的样品，非极性的柱子对于异构体的分离效果是很好的。至今还记得刚工作的第一年，换色谱柱的时候曾经犯过的错误，将极性的流动相泵进了非极性的柱子，对当时领导的宽容仍然心存感激，希望你不要不小心犯类似的错误。

有朋友留言，说是想了解色谱柱相关的信息，后面的推送中会有，敬请期待，我们先把常见的19个异常及排除讲完……




感谢原文的作者：



转载于PharmaGMP

hzleiyu

谢谢分享

静水蓝心

好资料，值得称赞