纯化水微生物限度检测

李会玲 · 发表于 2020-11-27 10:13:59

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“取纯化水20ml，用薄膜过滤法过滤，减压抽干，取出滤膜，将滤膜放入制备好的R2A培养基平板上，在30-35度培养不少于五天，计数。

这是我培养两天的纯化水

这是灭菌后的纯化水

阴性对照：取20ml已灭菌的纯化水按供试品同法处理，作为阴性对照。”
这是之前工作的小姐姐留下来的步骤，我有好多疑问
1.三联滤杯配了高温枪，可以灭菌，但是新亚的微孔滤膜怎么灭菌
2.步骤里没说缓冲液，冲洗液的事，我在网上查了可能需要，但是具体怎么做，多少量还是不知道
3.我看有的是10ml，都不可计数，那我20ml，没冲洗，没缓冲，就更不计数了。
4.请大家帮忙看看，给我指导一下

现在实验室就我一个实习生，找不到前辈请教，谢谢各位帮帮忙。

Joyce1234 · 发表于 2020-11-27 13:36:30

膜可以进行湿热灭菌，药典要求是取本品1ml，经薄膜过滤，小于100cfu，冲洗量的多少，你可以做一下这个方法学确认，一般是1ML重新量100ml

aliang3565 · 发表于 2020-11-27 14:48:48

20毫升长那么多。抽一毫升试试就知道了。

18777309701 · 发表于 2020-11-27 14:50:59

滤膜跟器具，取样瓶一起压力蒸汽灭菌

李会玲 · 发表于 2020-11-27 14:59:49

Joyce1234 发表于 2020-11-27 13:36
膜可以进行湿热灭菌，药典要求是取本品1ml，经薄膜过滤，小于100cfu，冲洗量的多少，你可以做一下这个方法 ...

你好，公司里的是三联滤杯，滤杯是敞口的，抽滤装置三个口特别长，放不进去，我问了之前做实验离职的小姐姐，结果她说她滤膜不灭菌，阴性对照不长菌，我觉得是水的取样量太多的原因。

李会玲 · 发表于 2020-11-27 15:02:08

aliang3565 发表于 2020-11-27 14:48
20毫升长那么多。抽一毫升试试就知道了。

一毫升不能把滤膜浸透啊，要放在无菌氯化钠溶液里么？是不是之前小姐姐的步骤有问题啊，

落了地的我 · 发表于 2020-11-27 15:17:45

围观学习！！

范范艾米 · 发表于 2020-11-27 16:21:38

滤膜用缓冲液浸湿，湿热灭菌。

同国兴 · 发表于 2020-11-29 10:59:07

1ml，用200ml缓冲液冲洗

15002939043 · 发表于 2020-11-30 10:49:35

最后怎么做的

李会玲 · 发表于 2020-11-30 11:00:08

18777309701 发表于 2020-11-27 14:50
滤膜跟器具，取样瓶一起压力蒸汽灭菌

滤膜需要用无菌氯化钠浸泡过后湿热灭菌么，用什么器具装滤膜，可不可以放到灭菌袋里，

18777309701 · 发表于 2020-11-30 14:23:26

李会玲发表于 2020-11-30 11:00
滤膜需要用无菌氯化钠浸泡过后湿热灭菌么，用什么器具装滤膜，可不可以放到灭菌袋里，

我就简单装烧杯，包上锡箔纸

254156409 · 发表于 2020-11-30 14:45:49

根据药典第二部来就可以啦，里面写很清楚

panlin2016 · 发表于 2021-4-6 17:35:31

微孔滤膜可以买一次性的啊，冲洗用的缓冲液药典有规定，一般不超过500ml.

栗子db1 · 发表于 2022-8-22 17:06:47

哇，你的膜做的很干净，求赐教，我的膜老是有一圈菌。可以方便聊聊吗