层析柱使用指南

killig · 发表于 2022-7-6 17:07:40

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请教一下使用层析柱装填层析介质时哪些控制要点呢?

killig · 发表于 2022-7-6 17:16:22

请教一下装好层析柱压缩介质时容易出现气泡是啥原因?

补充内容 (2022-7-7 10:54):
怀疑这些原因1.使用四通阀连接切阀进气，注射器上样测柱效有可能进气，2.装柱流速接近层析系统最低流速会不会导致管路分布不均容易进气?3.层析柱密封圈处残存气泡影响？能帮忙看看怎么更好解决吗?

401030551 · 发表于 2022-7-6 17:18:28

所有柱子尽量做到填料均匀，尤其是用于凝胶层析的柱子。装柱完成后，可用柱效测定的方法检

查装填效果。一个装填合格的柱子的理论塔板高度应是填料平均粒径的2-4 倍，在此范围内越小越好

唐e3phf8pp · 发表于 2022-7-11 09:36:46

GE的装柱SOP，你可以好好看看
实验室装柱问题汇总

401030551 · 发表于 2022-7-6 17:16:26

装柱包括以后使用中绝对不允许柱内进入气泡(bubble free),柱头事先也要排除气泡。

andyzheng · 发表于 2022-7-6 17:23:52

层析柱内径，填料装量，装填时用的溶剂，压实填料的工艺（高流速/轴向/径向），压实后填料的高度

猫咪特工 · 发表于 2022-7-7 07:47:04

纯化技术、层析技术资料_层析纯化蛋白柱
https://www.ouryao.com/forum.php ... &fromuid=547367
(出处: 蒲公英 - 制药技术的传播者 GMP理论的实践者)

killig · 发表于 2022-7-7 10:29:02

401030551 发表于 2022-7-6 17:16
装柱包括以后使用中绝对不允许柱内进入气泡(bubble free),柱头事先也要排除气泡。

确实是不能出现气泡的。好的

killig · 发表于 2022-7-7 10:29:32

木木杨1 发表于 2022-7-7 07:47
纯化技术、层析技术资料_层析纯化蛋白柱
https://www.ouryao.com/forum.php?mod=viewthread&tid=675669 ...

感谢分享。

killig · 发表于 2022-7-7 10:32:49

andyzheng 发表于 2022-7-6 17:23
层析柱内径，填料装量，装填时用的溶剂，压实填料的工艺（高流速/轴向/径向），压实后填料的高度

感谢答复，弱弱的问一下，0.1MNacl平衡，2MNacl手动上样测柱效电导峰在40Ms/cm咋解决呢？

killig · 发表于 2022-7-7 10:55:34

401030551 发表于 2022-7-6 17:18
所有柱子尽量做到填料均匀，尤其是用于凝胶层析的柱子。装柱完成后，可用柱效测定的方法检

查装填效果。 ...

感谢回复

奋斗的小青年a · 发表于 2022-7-7 11:15:48

killig 发表于 2022-7-7 10:32
感谢答复，弱弱的问一下，0.1MNacl平衡，2MNacl手动上样测柱效电导峰在40Ms/cm咋解决呢？

这不是主要问题，只要观察到有明显的电导变化就可以；电导在40mS/cm可能是因为管路内的0.1 M NaCl将 2M NaCl稀释了。电导峰的高低和Inject量有关，一般不大于柱体积的2.5%

奋斗的小青年a · 发表于 2022-7-7 11:18:43

killig 发表于 2022-7-6 17:16
请教一下装好层析柱压缩介质时容易出现气泡是啥原因?

补充内容 (2022-7-7 10:54):

如果手动Inject样品，存在四通阀切阀漏气现象，建议切阀时，连接一段充满水的管路，水封

补充内容 (2022-7-7 14:24):
哈哈，那就注射的时候把注射器垂直放置，打进去

andyzheng · 发表于 2022-7-7 12:27:31

木木杨1 发表于 2022-7-7 07:47
纯化技术、层析技术资料_层析纯化蛋白柱
https://www.ouryao.com/forum.php?mod=viewthread&tid=675669 ...

木老师有个机器猫的口袋

小金库 · 发表于 2022-8-5 19:25:28

谢谢分享。

ye326423 · 发表于 2022-8-14 09:04:58

这个资料好哦，我也做层析的

潘华柱 · 发表于 2022-10-15 16:03:16

唐e3phf8pp 发表于 2022-7-11 09:36
GE的装柱SOP，你可以好好看看
实验室装柱问题汇总

非常感谢~~~~下载学习了

15376446656 · 发表于 2023-3-30 13:34:57

nice nice nice