动物模型 | 肺栓塞动物模型的常用构建方法

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肺栓塞（pulmonary thromboembolism，PTE）是由于内源性或外源性栓子堵塞肺动脉主干或分支引起肺循环障碍的临床和病理生理综合征，由于肺栓塞未受到足够重视，并且发病及临床表现的隐匿性和复杂性，以致漏诊、误诊率高，在死前被正确诊断的病例仅为39%～50%。同时，在过去的几年里，我国PTE的患病率呈三倍以上增长。其发展迅速、临床表现复杂、病死率高，严重危害人们的身心健康。对该疾病进行深入研究，建立一稳定可靠的动物模型有着重要的科研意义。

动物的选择

研究肺栓塞的病理生理学及影像学，实验动物主要是狗、兔等；肺栓塞的治疗研究，动物主要是大鼠、小鼠。

造模方法

一、家兔肺栓塞模型

家兔模型是目前最为成熟和普遍使用的，而且家兔的纤容系统比狗和猪更接近于人体的纤容系统，所以家兔模型也是目前最为理想的肺栓塞模型。

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体外血栓形成法

造模方法：造模前从耳缘静脉抽血1 mL，注入无菌瓶内静置一段时间，使其凝血制成自体血凝块，再经股静脉注入制好的血凝块，辅以NS使血凝块随血液循环运行至肺动脉并将其堵塞，建立急性肺栓塞模型。

Tips：制作急性肺血栓栓塞模型的栓子很多，包括：血凝块、明胶海绵、玻璃体球状物、α2凝血酶、胶原蛋白等。一般实验室常用血凝块。由于自体血栓的形成和临床肺栓塞症血栓的形成具有一定的相似性，故能更真实地反映疾病的病理生理改变。

二、犬肺栓塞模型

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自体血凝块法

犬的急性肺栓塞模型多用体外自体血凝块法。

造模方法：股动脉抽血80～100mL，注入到含凝血酶的玻璃器皿中，静止使其凝固，制成大小约10mm×10mm×5mm的血块，经右颈静脉注入栓子，要维持肺动脉压在50～60mmHg，一旦低于50mmHg，需再次注入栓子，此过程持续30 min，之后稳定1h。

三、鼠肺栓塞模型

鼠模型的制备有的采用血凝块，有的用药物诱导，自体血凝块的制作与犬模型中的血凝块的制作方法相似。

栓子制作：无菌条件下从颈动脉插管取血0.5ml，迅速推入细聚乙烯导管，室温静置25～30 min凝固，推入生理盐水，制成直径约0.6～0.8 mm自体血栓。无菌手术刀切成长3～4 mm，灭菌生理盐水反复冲洗，计数约50个备用。

造模方法：腹腔注射20%乌拉坦6 ml/kg麻醉，必要时追加0.5 ml/h。沿颈前正中线做长约2cm 切口，钝性分离右颈外静脉和左颈动脉，插管分别接YP100型压力传感器，量程分别为(-10～10 kPa)和(-10～40 kPa)，动态监测肺动脉压和体动脉压的变化。右颈外静脉经导管快速、反复注入已制备血栓20～30个，注栓速度0.5 ml/s，使肺动脉收缩压(sPAP)维持在40～60 mmHg之间约60 min，生理盐水冲洗以防栓子滞留于导管或颈静脉内。缝合切口，电脑记录肺动脉压和体动脉压动态变化。

造模结果：大鼠自体血栓肺栓塞模型制备的成功率约85%。注入自体血栓20～30 min后，大鼠肺动脉压明显升高。早期肺动脉压升高后很快回落，后随血栓的注入逐渐持续升高，能维持2～4 h。同时大鼠呼吸加快加深，口唇发绀，两肺出现弥漫性干湿啰音等肺栓塞体征。肺灌注扫描ECT显像，见两肺明显放射性缺损和稀疏。大体组织见肺膨胀不全，胸膜下和切面上见较多的散在出血灶。肺组织光镜观察见肺动脉内有注入的血栓团块，以淡蓝色纤维素包绕大量红细胞，可区别于肺淤血。同时见肺血管壁肌层组织水肿，大量炎症细胞浸润。

优点：采用改良右心导管法，动态监测肺动脉压变化。其较通常的股静脉注栓法具有路径短、栓子稳定、可控性强等优点。

总结

经不断摸索，我司已构建成熟的肺栓塞动物模型。造模方法操作简便、成功率高、趋近真实、耗资低廉的优点，从而为该病的研究提供了坚实的物质基础和实验平台。

来源：临床医药文献杂志，2014