我用 「AI」做微生物方法学验证

沁人绿茶.

撰稿 | 石决明
来自 | 蒲公英Ouryao  
随着人工智能（AI）技术的飞速发展，其在医疗、金融、教育、交通等诸多领域的应用日益增多，展现出了强大的潜力和广泛的前景。

然而，在我们的日常工作中，微生物方法学验证一直是最具有难度的部分。这一过程不仅复杂繁琐，而且需要高度的专业知识和丰富的经验。

面对如此巨大的挑战，如果能够巧妙地利用AI整合现有的资源，就可以在很大程度上优化工作流程，减少不必要的重复劳动，从而大大提高工作效率，为相关领域的发展带来更多的机遇和突破。  

1.        直接求解太天真  

尝试一：直接上传了一本200多页的《药品微生物限度检查方法实例》到AI平台，然后询问一个书中未收录品种的验证方法。  

结果：AI平台仅能给出验证方案的文件框架，对于关键的抑菌性祛除环节，未给出任何有实质性意义的建议。  

这个结果既是坏消息，也是好消息。坏消息是AI不能直接解决我们的问题；好消息是，掌握技术的我们暂时还不会被AI取代。  

2.        发散思维的重要性  

有人问我原料药米卡芬净钠的微生物限度验证怎么做。困难是米卡芬净钠对真菌的抑制作用很强，验证中白色念珠菌几乎不长。国外厂商的验证资料中对这部分进行了几种尝试都未果，然后结论该品种对白色念珠菌有强抑制作用所以无需控制。

这就是国外微生物限度的控制思路和中国药典不一致的地方（详见：我们不一样——中美药典微生物限度差异初探），从而国外的资料也失去了利用价值，进口后只能重新开发。  

尝试二：直接AI搜索米卡芬净钠的微生物限度方法无果。进行发散思维，先了解一下米卡芬净钠的抑菌原理以及同类型药物，结果如下

作用机制是抑制一种物质的合成从而影响真菌细胞壁。同类型药物卡泊芬净国内已经上市。这两个点都是后续可以挖掘的潜在方向。  

3.        上游思维的应用

原料药的上游是成品制剂，米卡芬净钠的常见剂型是注射剂，已经上市的同类型药物的无菌检查方案中肯定有相应的中和方案。  

尝试三：AI搜索注射用卡泊芬净的无菌检查方法，结果如下：  

、看到这个结果，其实我们已经得到了一个值得实验进行尝试的方向。  

总结来说，利用AI进行微生物验证，实际上是利用其搜索功能。AI搜索具有以下优势：  

a)        搜索范围更广：覆盖网页、公众号文章等。  

b)        筛选重复内容：从大量资料中筛选出不重复的几篇。  

c)        归纳总结结果：无需打开链接内容查看，直接得到总结内容。如有需要，可点击归纳结果中的参考文献编号深入了解。  

原料药的微生物方法学开发有一定的常规套路：了解抑菌机制、提高溶解性、参考成品制剂的方法等。如果能够结合AI进行资料搜索，将大大提高工作效率。

更多观点，欢迎留言！！！

胜利者

如何

何元凯

感谢分享，学习了

star123q

勇于尝试

机智鼠

在微生物方法学验证中，AI的应用尚处于探索阶段。根据《药品微生物限度检查方法实例》的要求，验证过程需要严格遵循科学方法和标准操作程序。尽管AI可以提供一些辅助性的信息或框架，但关键步骤如抑菌性祛除等仍需依赖专业人员的知识和经验。因此，发散思维在此过程中显得尤为重要，它能帮助研究人员从不同角度思考问题，发现新的解决方案。同时，这也提醒我们，在利用AI技术时，不应忽视传统专业知识的重要性。

【鼠鼠还在学习中，内容仅供参考（药搭GMP软件提供技术支持）】

dengjianyyy

众所周知，灭菌介质是否无菌对无菌保障至关重要，我就想知道高温蒸汽无菌检验方法的验证怎么做，环氧己烷无菌检验方法的验证怎么做。

水淼

以下是米卡芬净钠原料药微生物限度验证的方案设计及相关表格模板，依据《中国药典》2020年版四部通则1105、1106及1107要求制定：

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### **一、验证目的**
验证米卡芬奋钠原料药的微生物限度检查方法的适用性，包括需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数测定及控制菌（如大肠埃希菌）检查的准确性。

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### **二、验证项目**
1. 需氧菌总数计数方法验证  
2. 霉菌和酵母菌总数计数方法验证  
3. 控制菌（大肠埃希菌）检查方法验证  

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### **三、验证方法选择**
- **需氧菌/霉菌酵母菌计数**：平皿法或薄膜过滤法（根据样品抑菌性选择）  
- **控制菌检查**：直接接种法或增菌培养法  

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### **四、验证方案设计**

#### **1. 样品制备**
- **供试液制备**：取米卡芬净钠10g，加入pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100mL，制成1:10供试液（必要时加入中和剂如聚山梨酯80或卵磷脂）。

#### **2. 方法适用性试验**
**（1）需氧菌总数及霉菌酵母菌计数验证**  
- **试验菌种**：  
  - 需氧菌：金黄色葡萄球菌（ATCC 6538）、枯草芽孢杆菌（ATCC 6633）、铜绿假单胞菌（ATCC 9027）  
  - 霉菌：白色念珠菌（ATCC 10231）、黑曲霉（ATCC 16404）  

- **试验分组**：  
  - **试验组**：供试液1mL + 菌液（含50-100CFU）→ 倾注TSA/SDA培养基  
  - **菌液组**：菌液（含50-100CFU）直接倾注培养基（阳性对照）  
  - **供试品对照组**：供试液1mL倾注培养基（检查样品自身是否长菌）  
  - **阴性对照组**：无菌稀释液1mL倾注培养基（检查无菌性）  

**（2）控制菌（大肠埃希菌）验证**  
- **试验菌种**：大肠埃希菌（ATCC 8739）  
- **试验方法**：  
  - **试验组**：供试液10mL + 菌液（含10-100CFU）→ 接种至胆盐乳糖增菌液  
  - **阳性对照组**：菌液单独接种至增菌液  
  - **阴性对照组**：无菌稀释液接种至增菌液  

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### **五、合格标准**
1. **需氧菌/霉菌酵母菌计数**：  
   - 试验组菌落数与菌液组比较，回收率应≥70%  
   - 供试品对照组及阴性对照组均无菌生长  

2. **控制菌检查**：  
   - 试验组应检出目标菌，阴性对照组无菌生长  

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### **六、验证记录表格**

#### **表1：需氧菌总数方法适用性试验结果**
| 试验菌种       | 菌液组CFU | 试验组CFU | 回收率（%） | 是否符合标准（≥70%） |
|----------------|-----------|-----------|-------------|----------------------|
| 金黄色葡萄球菌 |           |           |             |                      |
| 枯草芽孢杆菌   |           |           |             |                      |
| 铜绿假单胞菌   |           |           |             |                      |

#### **表2：霉菌酵母菌总数方法适用性试验结果**
| 试验菌种       | 菌液组CFU | 试验组CFU | 回收率（%） | 是否符合标准（≥70%） |
|----------------|-----------|-----------|-------------|----------------------|
| 白色念珠菌     |           |           |             |                      |
| 黑曲霉孢子     |           |           |             |                      |

#### **表3：控制菌（大肠埃希菌）检查验证结果**
| 试验组别   | 接种菌液 | 增菌培养结果（浑浊/产气） | 分离培养基结果 | 是否符合标准 |
|------------|----------|---------------------------|----------------|--------------|
| 试验组     | 大肠埃希菌 |                          |                |              |
| 阳性对照组 | 大肠埃希菌 |                          |                |              |
| 阴性对照组 | 无菌稀释液 |                          |                |              |

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### **七、注意事项**
1. 试验需在洁净室或生物安全柜中进行，避免污染。  
2. 若样品抑菌性强，需增加中和剂或提高稀释度重新验证。  
3. 所有培养基需提前进行适用性检查。  

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### **八、结论**
根据验证结果，判定米卡芬净钠微生物限度检查方法是否符合药典要求。

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以上方案可根据实际实验室条件及药典更新调整。建议委托专业微生物实验室开展验证，确保数据合规性。

wsx

dengjianyyy 发表于 2025-1-15 16:46
众所周知，灭菌介质是否无菌对无菌保障至关重要，我就想知道高温蒸汽无菌检验方法的验证怎么做，环氧己烷无 ...

这个就是问：如何证明水能把饭煮熟。