【分享经验】包材密封性验证中生物法与物理法的关联

药窕淑女

     包材密封性是无菌保障的关键要素。我们现在常用的方法是色水法和微生物挑战方法，虽然现在很多新的包材密封性检测方法，但是上述两种方法依然是目前常用的方法。
     在产品的稳定性留样期间，及产品上市后，产品是否依然密封，是我们考察的一个主要因素，以前一直是通过无菌测试的方法来检测稳定性期间的包材密封性，但是这里存在一定的局限性:①无菌测试仅仅考虑的是当时的微生物生长状态，而在稳定性留样期间，微生物可能经历了很多次死亡，再污染的过程。②无菌测试仅仅测试的是能在药液中生长的微生物，对于一些被产品抑制的微生物无法培养。③无菌测试也会出现假阳性的情况。基于上述局限性，开发一种物理方法来代替生物方法很有必要，通过色水法来代替微生物方法进行密封性检测，为直接用产品进行色水法试验提供支持
   最近正好在做这方面的工作，因此色水法与微生物挑战的方法关联性与大家分享一下：
1．  选定合适的染料
确认产品对染料的紫外吸收是否有干扰，若有干扰，需选择其他染料。
2．  确定该染料的最大波长
将染料配制成不同浓度的溶液，确认其最大波长。
3．  确定该染料的检测限
测定紫外吸收方法的线性，确定染料的检测限。
4．  确定微生物检测方法的灵敏度
准备5um，10um，15um，20um不同孔径的导管，通过打孔加入到包材的胶塞上，选择一定的压力和维持时间，确认不同的孔径下，出现阳性的比率。根据资料，一般是5um的孔径微生物不会进入，20um微生物全部进入。
压力和时间选择很重要，这个和色水法的关联很关键。一般的选择是75kpa，15~30min。
5．  确定色水法可以代替微生物法
   色水法也用5um的导管加入到包材的胶塞上，在4中的压力和维持时间下，色水是否被检测到，及进入色水高于检测限。如检测不到色水，需重新进行第4步操作，调整压力和时间，使色水的进入高于检测限。

上述是简单的梳理，具体可以参考分享的文献。

大呆子

还没做过这方面的工作，能讲的再详细点不？

window

楼主这篇是PDA技术杂志2000年的一篇文章了
物理测试法与生物测试法有一定关联性，但不能替代

werewolfman

有略微的接触过这方面的内容，可感觉做的咋不是类似的呢。

药窕淑女

window 发表于 2015-9-2 09:26
楼主这篇是PDA技术杂志2000年的一篇文章了
物理测试法与生物测试法有一定关联性，但不能替代

为什么不能替代呢
按照这个思路做也不能替代吗?
检漏仪是一个趋势，但是很贵啊，没买之前想用这个方法做的

window

药窕淑女 发表于 2015-9-2 09:30
为什么不能替代呢
按照这个思路做也不能替代吗?
检漏仪是一个趋势，但是很贵啊，没买之前想用这个方法 ...

同一思路：无菌过滤验证，完整性测试是否可替代微生物挑战测试
这或许大家更熟悉

北重楼

能讲的透彻一点吧

唐晓宇

同window蒲友的问题，微生物目前来说还是主流，比如为做湿热灭菌的时候，我明明知道温度穿透的时候F0值大于12能够杀灭10的6次方的芽孢，而且我实际的时候F0值可能都达到了3、40，可是我最终还是做了生物指示剂，这个目的是一样的，只不过一个是温度测试、一个是生物测试

syhorchid

谢谢分享

路_转角

我想咨询一下，5um、10um、15um的导管哪里买？？？

liangliangliu12

能讲的透彻一点吧

罗伊鲱

Development of a Dye Ingress Method to Assess Container-Closure Integrity: Correlation to Microbial Ingress

Anneyu_zY5yM

谢谢楼主分享。。。。。。。。。。。。。

erilles123

这个导管孔径会不会还是有点大？

hkqu

erilles123 发表于 2019-6-18 10:28
这个导管孔径会不会还是有点大？

无论用什么方法都要做适当的方法学验证

bohn2002

这是15的话题，ＰＤＡ２０００年都有方法了。我们的工作在２０２０才才开始，感觉已经落后很多了，奋起追赶吧！

小金库

谢谢分享