无菌灌装染菌之后菌种培养不起来怎么办

yuzhou大山 · 发表于 2017-1-19 10:43:38

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模拟无菌灌装染菌，但是是在第14天发现的，想要富集这个疑似菌，可是传到TSA和TSB上都不生长，我门无菌灌装使用的培养基就是胰酪胨大豆肉汤培养基，请问出现这个问题是什么原因？

静水蓝心 · 发表于 2017-1-19 11:59:29

奇怪了，你用的培养基不也是TSB么？怎么同样是TSB就不一样的结果

静水蓝心 · 发表于 2017-1-19 12:00:35

厌氧菌？

yuzhou大山 · 发表于 2017-1-19 13:58:37

静水蓝心发表于 2017-1-19 12:00
厌氧菌？

如果是厌氧菌的话，那什么情况下会染厌氧菌呢？我们灌装过程中有一个过程需要在冷冻干燥机中放置一定时间，如果是这个时间段染菌的话，会是厌氧菌吗？老师，不知道您有什么建议可以培养这个未知菌，用硫乙醇酸盐培养基可以吗？

静水蓝心 · 发表于 2017-1-19 17:03:07

Sandy陈发表于 2017-1-19 13:58
如果是厌氧菌的话，那什么情况下会染厌氧菌呢？我们灌装过程中有一个过程需要在冷冻干燥机中放置一定时间 ...

如果是真空放置的话，是有这个可能的。类似的经验我也没有，我只是怀疑，你可以用这个培养基试试。也期待你的经验分享。

yuzhou大山 · 发表于 2017-1-22 15:51:43

今天来把这两天的培养情况说一下，TSB培养基中培养3天时液体底部有一小块状物，但不是絮状的，所以当时怀疑培养起来了，第4天在观察时，发现底部已经有一大块絮状的一团物质了，这回很肯定是富集成功了！但是现在我又有个疑问，就是传tsb同时我划了TSA平板，但是平板上却什么也没有。而且革兰染色也染不出来东西。这是不是就是真菌？

jiang376 · 发表于 2017-1-22 15:56:14

你拍个照片看看

jiang376 · 发表于 2017-1-22 15:57:38

我以前见过不是微生物，是因为培养基本身的问题导致的，当然你这个如果能够富集和划线，应该是没有问题的，你试一下倒置显微镜观察

yuzhou大山 · 发表于 2017-1-22 16:04:23

jiang376 发表于 2017-1-22 15:57
我以前见过不是微生物，是因为培养基本身的问题导致的，当然你这个如果能够富集和划线，应该是没有问题的， ...

您说的这个“不是微生物，是培养基本身问题”指的是什么呢?本人愚钝，还望指教。我们只有普通的光学显微镜，染色时，挑菌、风干都很正常，但是一到水洗时载玻片上就什么也没有了。

jiang376 · 发表于 2017-1-22 19:33:47

Sandy陈发表于 2017-1-22 16:04
您说的这个“不是微生物，是培养基本身问题”指的是什么呢?本人愚钝，还望指教。我们只有普通的光学显微 ...

液体培养基，有时候由于培养基质量问题还有配置过程溶解不充分，静置一段时间会发生絮凝现象

yuzhou大山 · 发表于 2017-2-28 14:50:06

本人来做个总结，毕竟自己开的帖子，原来说TSB富集出来了，但是TSA平板上却长不出来，而且染色染不出结果。后来又用SDA和SDB分别富集，很成功。染色也有结果了。不是厌氧菌。前段时间培训，老师也说了，有的水系统中的菌会在监测时收集到，但是当富集时就富集不出来了，很可能是这种菌是一类需营养不高的菌，所以使用TSB这类营养价值高的培养基时，生长的并不好。所以鉴定的话，就要采用更先进的方法了，如基因测序。

swylove1987 · 发表于 2017-2-28 14:54:51

我们之前也遇到过类似情况，经鉴别和查找相关资料很有可能是培养基与盛装包材发生化学反应导致的浑浊。

冷酷仙境87 · 发表于 2017-3-20 13:39:50

也有可能你筛到了类似VBNC的东西

小金库 · 发表于 2023-4-29 20:40:01

非常感谢分享

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