液相色谱和紫外分光光度结果不一致

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请教一下各位大佬：检测溶出样品，用紫外分光光度测定的结果和液相结果不一致，液相结果偏高，约5%。所用的供试品溶液是同一份，对照品溶液也是同一份，是什么原因导致这样的结果呢？

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门门

对于此问题的情况 是如下原因：
液相受溶剂、受杂质的影响小；
对照品溶液中其它有紫外吸收的物质，
比供试品溶液中其它有紫外回收的物质
多。
至于是怎么多出来的，原因就太多了，说不清楚。
前提是检验没有其他错误啊（比如算错了，比如紫外忘了空白归零了，比如液相进样不准了，比如液相小瓶污染了）

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门门 发表于 2023-02-17 22:21
本帖最后由 门门 于 2023-2-17 22:30 编辑

对于此问题的情况 是如下原因：
液相受溶剂、受杂质的影响小；
对照品溶液中其它有紫外吸收的物质，
比供试品溶液中其它有紫外回收的物质
多。
至于是怎么多出来的，原因就太多了，说不清楚。
前提是检验没有其他错误啊（比如算错了，比如紫外忘了空白归零了，比如液相进样不准了，比如液相小瓶污染了）

您的意思是对照品不纯，在测定波长下，杂质和主成分都有吸收，导致紫外分光光度法对照品的响应偏高是吗？但是我们在液相色谱图上，没有看到对照品溶液有大的杂质峰啊

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郭啊盼

因为紫外分光光度计和高效液相色谱的方法原理是一样的。所以理论上讲两者测定出来的结果应该相差不多。考虑溶解充分不充分，或者说溶出会不会受时间、温度的影响。紫外测的快，高效液相从配制样品到进样分析会有一段时间差，并且柱温也会比紫外的温度高。差5%是有点多的。

lanran

UV的专属性稍微差点的

猫咪特工

常见的导致这种情况的原因有以下几种：

不同的检测原理和灵敏度：液相色谱法和紫外分光光度法都是从不同角度对样品进行检测，不同的检测原理和灵敏度可能会导致结果不一致。

样品制备不同：液相色谱法和紫外分光光度法对样品制备的要求也不同，不同的制备方法可能会影响结果的准确性。

操作过程的差异：操作过程中的温度、时间等条件也可能对结果产生影响。

仪器校准问题：不同的仪器可能会有不同的误差，需要对仪器进行校准，以确保结果的准确性。

针对这种情况，可以先检查操作过程和仪器是否正常，比较两种方法的原理和操作要求，找出差异的原因，进行合理的校正和修正。此外，可以尝试使用其他的检测方法进行验证，以确定结果的准确性。

门门

1760595202 发表于 2023-2-17 22:49
您的意思是对照品不纯，在测定波长下，杂质和主成分都有吸收，导致紫外分光光度法对照品的响应偏高是吗？ ...

嗯 我是这个意思，可能它在当前液相条件下，出峰时间特别晚，所以没出来。
还有溶剂的影响。
含量不同方法之间的差别一般很小，连滴定都算上，也不至于超过3%。
5%再找找原因吧，两种方法都弄个回收率试验看看？

门门

木木杨1 发表于 2023-2-18 09:42
常见的导致这种情况的原因有以下几种：

不同的检测原理和灵敏度：液相色谱法和紫外分光光度法都是从不同 ...

......你这是AI回答的？

正在学习的小白

你这什么信息都不给，比如你是单独某个点偏高，还是说两个方法，液相整体都偏高

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心清如水

郭啊盼 发表于 2023-2-18 08:13
因为紫外分光光度计和高效液相色谱的方法原理是一样的。所以理论上讲两者测定出来的结果应该相差不多。考虑 ...

如果上述这些原因，液相出来的结果应该比紫外的低。

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正在学习的小白 发表于 2023-02-18 11:21
你这什么信息都不给，比如你是单独某个点偏高，还是说两个方法，液相整体都偏高

最终溶出结果，HPLC法结果高于UV法，取样点5，10，15，20，30，45min，从20分钟开始就偏高了，前面三个点差距没有这么大。

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门门

1760595202 发表于 2023-2-18 15:11
最终溶出结果，HPLC法结果高于UV法，取样点5，10，15，20，30，45min，从20分钟开始就偏高了，前面三个点 ...

噢 明白了，紫外吸光度是不是 大于1.000了？
吸光度值在0.3~0.7之间为宜

可爱的飞龙

应该配制一个已知浓度的样品，看看到底是哪个方法的偏差，再说

315261187

木木杨1 发表于 2023-2-18 09:42
常见的导致这种情况的原因有以下几种：

不同的检测原理和灵敏度：液相色谱法和紫外分光光度法都是从不同 ...

也想知道，这回复是否是AI回答。