逆向工程中山梨醇含量测定

Mothong

已知某参比制剂（口服溶液）中山梨醇含量为240mg/ml；使用HPLC-RID检测出该参比制剂山梨醇含量约200mg/ml；然后对该方法进行回收率线性专属性重复性考察均符合要求；
想求助各位老师，问题可能出在哪里？
补充：色谱柱为ECOSIL Sugar Ca2+，流动相为水，稀释剂也是水。

icare

你想问的问题是什么？
测得的含量数值跟参比制剂的标示含量不一致吗？
参比制剂的装量差异、降解。

Mothong

奔跑的中年 发表于 2024-7-18 13:24
你想问的问题是什么？
测得的含量数值跟参比制剂的标示含量不一致吗？
参比制剂的装量差异、降解。

参比是溶液状态，一般来说是均一的状态，应该和装量是无差异的；山梨醇是比较稳定的，不应该存在降解的可能，现在通过实验好像是该溶液中另一种辅料HEC对这个检测有干扰，不是从保留时间上的干扰，而是怀疑山梨醇与HEC结合了被其带走的那种，但是苦于没有理论支撑，且不知道如何去破坏这种“结合”的干扰。

416301116

Mothong 发表于 2024-7-18 15:15
参比是溶液状态，一般来说是均一的状态，应该和装量是无差异的；山梨醇是比较稳定的，不应该存在降解的可 ...

那自己做一下按照不同比例的山梨醇和HEC的混合研究，根据数据反推一下

Mothong

416301116 发表于 2024-7-18 15:22
那自己做一下按照不同比例的山梨醇和HEC的混合研究，根据数据反推一下

没有接着往下做了，单独把两个东西混一起证实会干扰就没做了，现在在考察不同的稀释剂

seo_0401

测了几批参比制剂，可以多测几批看一下，是不是都是这个水平？如果怀疑是分析方法的，可以优化一下条件，比如升高柱温、减小进样量等看一下

Mothong

seo_0401 发表于 2024-8-13 16:25
测了几批参比制剂，可以多测几批看一下，是不是都是这个水平？如果怀疑是分析方法的，可以优化一下条件，比 ...

现在手里只有一个批次参比，我的想法还是按说明书的往下走，分析方面条件也进行了不少优化，包括更换不同类型色谱柱，调整柱温，流速，进样量，进样浓度等

机智鼠

在逆向工程中山梨醇含量测定问题中，尽管HPLC-RID的回收率、线性、专属性、重复性均符合要求，但实际测得的山梨醇含量（约200mg/ml）与参比制剂已知含量（240mg/ml）存在显著差异。可能的原因包括：

1. **样品制备过程中的稀释误差**：使用水作为流动相和稀释剂，若未严格按照等量稀释步骤执行，可能造成实际进样浓度偏低。
   
2. **色谱柱选择性问题**：ECOSIL Sugar Ca2+柱虽针对糖类有特定保留能力，但对山梨醇可能存在吸附不足或解析不完全，导致检测值偏低。

3. **方法验证范围不充分**：虽然进行了回收率线性专属性重复性考察，但可能未能全面评估不同浓度级别下的准确度和精密度。

综上，建议重新评估样品稀释过程的准确性，考虑更换或并行验证其他类型色谱柱的效果，并扩大方法验证的范围和深度。

【鼠鼠还在学习中，内容仅供参考（药搭GMP软件提供技术支持）】

Mothong

机智鼠 发表于 2024-9-9 17:18
在逆向工程中山梨醇含量测定问题中，尽管HPLC-RID的回收率、线性、专属性、重复性均符合要求，但实际测得的 ...

色谱柱已经进行过更话，结果无变化，验证的范围和深度能举例说明吗