培养基阴性对照长菌

青柠LAW

最近做环控实验，发现阴性对照培养基（TSA）长菌,用的是外购的预灌装培养基，经过电子束辐照灭菌。使用前检查没有发现长菌，培养后有个别片出现长菌情况，请问是什么原因？

wzzz2008

污染了，实验失败，重新做吧。

机智鼠

回复:

在环控实验中，阴性对照培养基（TSA）出现长菌的情况可能由以下几个原因造成：

1. 培养基污染：尽管使用了电子束辐照灭菌，但培养基在生产、包装或运输过程中可能受到微生物污染。
2. 操作失误：在取样或培养过程中可能存在无菌操作不严格的情况，导致外界微生物的侵入。
3. 培养条件：培养箱的温度、湿度等环境条件可能不适合抑制某些微生物的生长，从而导致长菌。
4. 培养基质量问题：外购的预灌装培养基可能在质量控制上存在缺陷，如密封性不足等。

建议采取以下措施：
1. 检查并优化无菌操作流程，确保所有操作步骤符合无菌技术要求。
2. 验证培养箱的性能，确保其能够提供适宜的培养条件。
3. 与供应商沟通，了解预灌装培养基的质量控制情况，必要时更换其他批次的产品进行复检。
4. 如果问题持续存在，考虑使用其他品牌的预灌装培养基进行对比测试。

参考法规或指南条款：《药品生产质量管理规范》（GMP）相关章节关于无菌药品生产的环境和设备控制要求；《医疗器械生产质量管理规范》中对于医疗器械生产过程中的无菌操作和环境控制的规定。

【鼠鼠还在学习中，内容仅供参考（药搭GMP软件提供技术支持）】

八档丶电风扇

外购的辐照的成品培养基也不一定完全无菌的。
我们就有出现过成品培养基未使用拆袋发现有长菌的平皿；
当然大概率还是你们使用过程被污染了，是不是不小心把阴性对照给打开了

青柠LAW

八档丶电风扇 发表于 2025-2-25 14:19
外购的辐照的成品培养基也不一定完全无菌的。
我们就有出现过成品培养基未使用拆袋发现有长菌的平皿；
当 ...

因为不止一次出现这情况了，所以我们也做了调查，人员操作是没问题的，培养箱也做了清洁消毒。跟培养基供应商沟通了，他们那边也调查了，反馈也没发现什么问题。使用前检查过是没长菌的，如果培养基不完全无菌，在储存的过程中应该会长起来了吧。还是说是需氧菌，辐照没彻底杀死，打开包装培养就长出来了

八档丶电风扇

青柠LAW 发表于 2025-2-25 14:50
因为不止一次出现这情况了，所以我们也做了调查，人员操作是没问题的，培养箱也做了清洁消毒。跟培养基供 ...

没拆封低氧是一方面、还有就是温度，培养基储存温度相对较低，一般需氧菌是比较少能长出来的，所以拆封的时候会发现没问题，如果是不止一次、看看是不是同一个人操作的。如果是多人操作都是这样、那么大概率是培养基问题、
可以换个供应商换个牌子的用一下、就知道是不是他的问题了

青柠LAW

好的，谢谢

青柠LAW

八档丶电风扇 发表于 2025-2-25 15:16
没拆封低氧是一方面、还有就是温度，培养基储存温度相对较低，一般需氧菌是比较少能长出来的，所以拆封的 ...

好的，谢谢

9567487345

1：本身就污染了；这个批次的培养皿有问题2：人员误操作打开平皿了3：收取到送检这个时间段的空窗期，比方说12点检测结束，培养间17点才开门，这个期间你们的sop规定送检的平皿应放在层流下，却放在普通区的随意隐藏角落，方便送样，然后污染了。

田园小草

事情可大可小，先写个oos，再启动偏差

微信6ca2474e

有可能培养基本来就不是合格品。在上家公司，生产人员在生物安全柜操作时，没有做沉降菌监测，送检时直接拿了培养基送去检测，结果还是长菌了

wzzz2008

9567487345 发表于 2025-2-25 16:35
1：本身就污染了；这个批次的培养皿有问题2：人员误操作打开平皿了3：收取到送检这个时间段的空窗期，比方 ...

1、2赞同。
3是怎么说，
如果在一般区转移过程中就会污染，那培养过程中怎么办，难道培养箱还得是带层流的？