关于C18柱保留问题

xovin

最近做几个***钠盐产品，按色谱理论和现有文献报道，该类产品为强电离强极性物质，在C18反相柱上是没有保留的，需要通过增加正戊胺来增加产品的保留，但是我在实际试验中发现，这个物质其实在C18柱上有挺强的保留，完全不需要离子对试剂来增加保留。然后我想问为什么都说反相柱上强极性强电离的物质没有保留呢，那我试验做出来的如何解析？

zysx01234

C18柱绝大多数是极性柱吧，根据相似相容原理主要用于分析有极性的物质，因此没有啥奇怪的。

选用的流动相基本是极性比较大的，甲醇、乙腈、水最常用

hongwei2000

谁教你说钠盐产品在C18柱上没有保留的，你去看一下药典有多少钠盐用C18柱的。
这个要看你活性成分的极性如何，即使是糖类这样的极性化合物在C18柱上也有一定的保留。
又是谁告诉你说加入正戊胺来增加保留的。
所谓钠盐保留差，是说钠盐产品在电离状态下呈离子状态，所以极性强，所以保留差。
那么什么情况下产品呈离子状态，对于钠盐产品来说，当流动相pH值远大于（例如大于2）pKa时，那么离子状态的比例就远大于分子状态，这时产品主要呈离子状态，在C18柱上的保留就比较差。
相反，如果流动相pH值远小于（例如小于2）pKa时，那么分子状态的比例就远大于离子状态，这时产品主要呈分子状态，在C18柱上的保留就比较好。
正戊胺为伯胺，呈碱性，流动相中加入这个东西，不是在加大pH值吗，怎么会有助于延长保留时间？

xovin

我们的产品是双膦酸盐，在水溶液状态下是强电离的强极性的，在低pH值下是氢离子与酸根的平衡，在高pH下是钠离子和酸根的平衡，试验表明在反相柱一般pH2-8范围内，产品均主要以离子形式存在，按@hongwei2000 说的那样在大pH值下处于阴离子态，阴离子会与胺结合，增加保留，跟试验是一致的。主要是我现在不使用离子对试剂，在pH7下，一样有明显的保留（水和钠离子出峰在约2min，主峰出在约10min），这好像与常规说的强电离强极性不保留不符，这个应该怎么解析。

hongwei2000

xovin 发表于 2017-11-24 11:31
我们的产品是双膦酸盐，在水溶液状态下是强电离的强极性的，在低pH值下是氢离子与酸根的平衡，在高pH下是钠 ...

看来你的药品是有一些特殊
不是常有的羧酸盐
二膦酸很大程度上属于中强甚至强酸
所以可能在C18适用的pH范围内很难确保其呈分子状态
但也不一定完全就能说强电离就是强极性
强电离可以说是有个强极性的脑袋
但也有可能有弱极性的尾巴
典型的就是我们常用的离子对试剂
例如十二烷基硫酸钠