【默克】一文读懂2020版药典HPLC变化 修改稿

ZMDTZS

【默克】一文读懂2020版药典HPLC变化

2020版《中华人民共和国药典》四部HPLC与2020版《中华人民共和国药典》四部HPLC有那些变化,请看下图：

2015版药典四部0512	2020版药典四部0512
1. 对仪器的一般要求和色谱条件	1. 对仪器的一般要求和色谱条件
1.1色谱柱 色谱柱内径一般为3.9-4.6mm, 填充剂粒径为3-lOμm 超高效液相色谱是适应小粒径约（2μm）填充剂的耐超髙压、小进样量、低死体积积、高灵敏度检测的高效液相色谱 。 温度会影响分离效果，品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温，应注意室温变化的影响。为改善分离效果，可适提高色谱柱的温度，但一般不宜超过60℃。 残余硅羟基未封闭的硅胶色谱柱，流动相 PH 值一般应在2-8之间。残余硅羟基巳 封闭的硅胶、聚合物复硅胶或聚合物色谱柱可耐受更广泛PH值的流动相，适合于PH值小2或大于8的流动相。	1.1色谱柱 色谱柱内径一般为2.1-4.6mm, 填充剂粒径为2-lOμm 超高效液相色谱是耐超髙压、小进样量、低死体积积、高灵敏度检测的高效液相色谱 。 温度会影响分离效果，品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温，应注意室温变化的影响。为改善分离效果，可适提高色谱柱的温度。 残余硅羟基未封闭的硅胶色谱柱，流动相 PH 值一般应在2-8之间。烷基硅烷带有立体侧链保护，或残余硅羟基巳 封闭的硅胶、聚合物复硅胶或聚合物色谱柱可耐受更广泛PH值的流动相，可适合于PH值小2或大于8的流动相。
1.2检测器	1.2检测器 增加“电雾式检测器”
1.3流动相	1.3流动相 删除“品种正文文项下规定的条件除填充剂种类、流动相组分~在该品种正文项 下注明。” 增加“流动相的洗脱方式”
	1.4色谱参数调整 新增内容
2. 系统适用性试验	2. 系统适用性试验
2.1色谱柱的理论数（n )	2.1色谱柱的理论数（n )
2.2分离度（R）	2.2分离度（R）
2.3灵敏度 通过测定一系列不同度的供试品或对照品 溶液测定噪比。	2.3灵敏度 建立方法时，可通过测定一系列不同度的供试品或对照品 溶液测定噪比。
2.4拖尾因子（T） 沿与此平行线交点的距离（如图）。	2.4拖尾因子（T） 沿与此平行线交点的距离，见下图。
2.5重复性 用于评价色谱系统连续进样时响应值的重 复性能。采用外标法时，通常取各品种项下的对照品溶液，连续进样5次，除另有规定外，其峰面积测量值的相对标准偏应不大于2.0%;采用内标法时，通常配制相80%、100%和120%的对照品溶液，加人规定量的内标溶液，配成3种不同度的溶液，分至少进样2次，计算平均因子，其相对标准偏差应不2.0%。	2.5重复性 用于评价色谱系统连续进样时响应值的重 复性能。除另有规定外，通常取各品种项下的对照品溶液，连续进样5次，其峰面积测量值（或内标值或其矫正因子）的相对标准偏应不大于2.0%;视进样溶液的浓度和/或体积、色谱峰响应和分析方法所能达到的精度水平等，对相对标准偏差的要求可适当放宽或收紧，放宽或收紧的范围 以满足品种项下检测需要的精密度要求为准。
3测定法	3测定法
	3.1定性分析  全部为新增内容
	3.1.1利用保留时间定性  新增内容
	3.1.2利用光谱相似度定性   新增内容
	3.1.3利用质谱检测器提供的质谱信息定性  新增内容
	3.2定量分析
3.1内标法	3.2.1内标法
3.2外标法	3.2.2外标法
3.3加校正因子的主成分自身对照法	3.2.3加校正因子的主成分自身对照法
3.4不加校正因子的主成分自身对照法	3.2.4不加校正因子的主成分自身对照法
3.5面积归一化法	3.2.5面积归一化法 增加“如适用，也可使用其他方法如标准曲线法等，并在品种正文项下注明。”
	4多维液相色谱 “多维液相色谱技术”全部为新增内容

从以上列表对比可以看出：

2020版药典四部HPLC与2015版药典四部HPLC调整力度之大，前所未有。

色谱柱内径、充剂粒径发生了改变，色谱柱内径由3.9-4.6mm调整为2.1-4.6mm，充剂粒径由3-l0μm为2-10μm；

色谱柱新增烷基硅烷带有立体侧链保护柱,这些改变扩大了色谱柱的选择范围，从事HPLC操作的都知道，色谱柱的类型决定了色谱柱的性质，色谱柱的的长度、粒径影响分析时间分析效率。

在分析具体品种时，保留时间、溶质之间的分离情况、出峰顺序等色谱柱的保留行为都可能出现较大的差异，根据当前技术水平调整色谱柱的内径范围及填充剂的粒径范围更有利于提高样品的色谱分析质量。

对仪器的一般要求和色谱条件

增加“色谱参数调整”大段内容。

对固定相、填充剂粒径柱长、流速、进样体积、梯度洗脱程序、流动相比例、流动相缓冲盐浓度、柱温、PH值从等度洗脱和梯度洗脱两个方面规定了参数调整范围，但检测波长不可调整。

样品分析如进行色谱参数调整，系统适用性应符合要求；

应评估色谱参数调整对分离度和检测结果的影响程度，根据评估结果对调整色谱参数后的方法进行确认；

如调整超出2020版药典四部HPLC中规定的范围，调整的方法应进行方法学验证达到可接受水平后方可用于产品的检验。

检测器增加“电雾式检测器”。

液相检测器分为选择性检测器与通用检测器，电雾检测器是十几年来出现的一种新型的检测器，灵敏度高、检测极限低，具有兼容性、重现性好的特点，将“电雾式检测器”纳入2020版药典四部HPLC符合检测器当前技术发展趋势。

流动相增加了“增加“流动相的洗脱方式”，包括等度洗脱、梯度洗脱。

定量分析前新添加了“定性分析方法”如利用保留时间定性、利用光谱相似度定性、利用质谱检测器提供的质谱信息定性。利用保留时间定性，该方法2015版药典对于具体品种进行鉴别时应用了该方法，只是未列入HPLC内容，这次列入到HPLC通则。

一种新型分离技术“多维液相色谱”列入2020版药典四部HPLC定量分析，对于复杂性样品分析的相对于现在使用一维色谱的，拓宽了样品的分离空间，提高了HPLC系统的分离能力。

2020版药典四部HPLC与2015版药典四部HPLC调整力度大,反映了当前国内HPLC检测技术发展现状又与国际检测技术更加协调。

yueluo

谢谢分享。

jingpaiqc

先mark，后面需要的时候来仔细看看

王兴来

下次可以使用编辑进行补充信息，上一篇我帮你删除掉

ZMDTZS

文章最后一段，“色谱柱内径由3.9-4.6mm调整为2.1〜4.6mm”调整为“色谱柱内径由3.9-4.6mm调整为2.1-4.6mm”

13675208275

感谢分享！！！学习学习

王兴来

ZMDTZS 发表于 2020-7-24 16:21
文章最后一段，“色谱柱内径由3.9-4.6mm调整为2.1〜4.6mm”调整为“色谱柱内径由3.9-4.6mm调整为2.1- ...

已经改过来了，下次有改动可以在帖子内@我