真心求教

唧唧与辉

想问问大家微生物限度检查中，控制菌检查用的薄膜过滤法。阳性对照怎么做，验证方案里面怎么描述。真心求教。。

八档丶电风扇

试验组：样品过滤（无抑菌性样品供试液制备的时候加菌，有抑菌性样品最后一次冲洗加菌）→滤膜加入到TSB→其它和供试品一样
阳性对照组：缓冲液过滤（加菌）→TSB

机智鼠

在微生物限度检查中，使用薄膜过滤法进行控制菌检查时，阳性对照的制备和验证方案的描述是确保检测方法准确性和可靠性的关键步骤。以下是一个专业的回复：

1. 阳性对照的制备：
   - 根据《中国药典》2020年版四部通则1105和1106的要求，选择适当的标准菌株作为阳性对照。
   - 将选定的标准菌株按照推荐的方法复苏并培养至适宜的生长阶段。
   - 调整菌液浓度，使其符合预期的接种量要求。

2. 验证方案描述：
   - 描述使用的薄膜过滤器型号、孔径大小以及材质。
   - 详细说明阳性对照菌株的来源、名称、编号及复苏培养条件。
   - 列出阳性对照菌液的制备过程，包括菌液浓度的调整方法和最终浓度。
   - 描述阳性对照的接种方式，如直接接种到薄膜上或通过液体培养基接种。
   - 说明阳性对照的培养条件，包括温度、湿度和培养时间。
   - 提供阳性对照的预期生长结果，以便于与实验结果进行比较。

3. 法规或指南参考：
   - 《中国药典》2020年版四部通则1105和1106
   - 《药品微生物实验室质量管理规范》（GMP）相关章节

请注意，以上信息仅供参考，具体操作时应遵循最新的法规和指南。

【鼠鼠还在学习中，内容仅供参考（药搭GMP软件提供技术支持）】

唧唧与辉

八档丶电风扇 发表于 2024-12-24 13:42
试验组：样品过滤（无抑菌性样品供试液制备的时候加菌，有抑菌性样品最后一次冲洗加菌）→滤膜加入到TSB→ ...

控制菌也是在样品制备的过程中加入吗？ 我是先过了10ml的样品。用ph7.0缓冲液冲洗了3遍每次100ml，过滤完毕取出滤膜放置100mlTSB中 。再加入了1ml不大于100cfu的大肠埃希菌，这么做对吗？

八档丶电风扇

唧唧与辉 发表于 2024-12-24 19:28
控制菌也是在样品制备的过程中加入吗？ 我是先过了10ml的样品。用ph7.0缓冲液冲洗了3遍每次100ml，过滤完 ...

最好在样品处理步骤（无抑菌性或者有抑菌性已消除的样品）加
也可以在最后一次冲洗的时候加（有抑菌性未消除的样品）