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[检验及监测] 黑曲霉在SDA斜面培养

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药徒
发表于 2017-2-6 14:07:03 | 显示全部楼层 |阅读模式

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-30摄氏度,储存在冻干管的黑曲霉第二代,划线于沙氏葡萄糖琼脂斜面上,33摄氏度左右,培养了10天,斜面结果如图,第五幅图为显微镜镜检图。
问题一:感觉这次传代长得不是很好,第七天的时候准备收了,可是还有很多气生孢子没长出来,为什么?
问题二:肉眼还看到了一颗颗白色的大粒的东西,大家帮我看看这是什么?
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药徒
发表于 2017-2-7 15:43:45 | 显示全部楼层
本帖最后由 tiantiancw 于 2017-2-7 15:45 编辑

白色的应该是未成熟的孢子,很多没长出来是因为浓度大了,下次浓度小点,斜面就漂亮了
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药徒
发表于 2017-2-6 15:25:50 | 显示全部楼层
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药师
发表于 2017-2-7 09:35:22 | 显示全部楼层
建议您再追溯一下吧,不像第二代,不一定对。与当地药检所的老师咨询一下吧。
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药徒
发表于 2017-2-8 11:14:51 | 显示全部楼层
看显微形态,应该没有染菌,是未成熟孢子。觉得你接种浓度高了。是用孢子悬液吗?
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药徒
发表于 2017-2-8 11:15:35 | 显示全部楼层
tiantiancw 发表于 2017-2-7 15:43
白色的应该是未成熟的孢子,很多没长出来是因为浓度大了,下次浓度小点,斜面就漂亮了

赞同,白色培养一段时间都可以见到
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药徒
发表于 2017-2-9 08:51:57 | 显示全部楼层
请教下,你黑曲霉镜检怎么做的?取孢子直接油镜 观察吗?在什么环境下做的呢?
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药徒
 楼主| 发表于 2017-2-18 18:44:12 | 显示全部楼层
星晴絮语 发表于 2017-2-9 08:51
请教下,你黑曲霉镜检怎么做的?取孢子直接油镜 观察吗?在什么环境下做的呢?

这张图霉菌镜检用低倍镜看的,你可以用低倍镜或者高倍镜看。油镜我用来看细菌的。在没有开风机的生物安全柜内酒精灯旁制片,滴一点水在在载拨片上,挑斜面上的黑曲霉涂开。

点评

看霉菌孢子 可能用 透明胶带制片法 更好,因为可以同时观察到完整的 孢子囊 和单颗孢子的形态  发表于 2017-2-18 20:37
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药徒
 楼主| 发表于 2017-2-18 18:46:18 | 显示全部楼层
xqliu 发表于 2017-2-7 09:35
建议您再追溯一下吧,不像第二代,不一定对。与当地药检所的老师咨询一下吧。

这是取第二代的冻存管,划线于SDA上的,属于第三代了。
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药徒
 楼主| 发表于 2017-2-18 18:55:07 | 显示全部楼层
小牛圈圈 发表于 2017-2-8 11:14
看显微形态,应该没有染菌,是未成熟孢子。觉得你接种浓度高了。是用孢子悬液吗?

取冻存管划线到SDA斜面上的。冻存管里头是黑曲霉孢子悬液和含有甘油的0.9%氯化钠溶液的混合物
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药徒
 楼主| 发表于 2017-2-18 18:56:32 | 显示全部楼层
小牛圈圈 发表于 2017-2-8 11:14
看显微形态,应该没有染菌,是未成熟孢子。觉得你接种浓度高了。是用孢子悬液吗?

当时划线的时候怕长得疏,所以来回多划了几回。
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药徒
 楼主| 发表于 2017-2-18 18:57:16 | 显示全部楼层
jiangkuiab 发表于 2017-2-8 11:15
赞同,白色培养一段时间都可以见到

圆圆的一颗颗的,第一次见这种东西
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药徒
发表于 2017-2-20 13:11:54 | 显示全部楼层
Sumy 发表于 2017-2-18 18:56
当时划线的时候怕长得疏,所以来回多划了几回。

应该是接种浓度高了。你下次可以试一下,接种后每天都观察看一下,刚长起来的时候应该是白的。
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发表于 2017-4-10 16:10:20 | 显示全部楼层
请问一下,药典不是规定在25度培养吗?我用SDA斜面25度培养14天都没这么黑,孢子到是很多,但好像长不大
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