关于方法验证：回收率和专属性

everlife · 发表于 2018-12-18 21:44:34

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各位老师好！

我在做一个原料药含量分析方法的验证（HPLC法)，遇到2个问题：

1、准确度回收率的样品溶液怎么配置？查阅资料，看到有三种做法

1)用原料药样品配 80%，100%，120%的溶液，检测回收率

2)用对照品配置80%，100%，120%的溶液，检测回收率

3)在方法中供试品溶液中添加对照品80%，100%，120%，然后计算：（检测实际值-供试品溶液原来浓度）/理论添加量*100%=回收率

请问哪一种是正确的？

2、专属性：要不要做破坏性试验？还是只确认空白溶剂有无干扰？

谢谢各位，往不吝赐教！

tuange · 发表于 2018-12-19 09:34:45

只是原料含量不需要做回收率，专属性肯定要全套做

katy · 发表于 2018-12-19 06:50:45

原料含量的专属性，药典方法，空白确认就好，没必要太复杂。回收率的话，原料药80%,100%,120%

补充内容 (2018-12-19 09:16):
我上面说的不对，你看看药典四部，9101，P375-376，说的很清楚

超厉害 · 发表于 2018-12-18 22:03:44

我觉得第三种比较好个人理解哈我也不太懂坐等各位老师的回答

lhd000000 · 发表于 2018-12-18 23:42:51

加样回收

wwhcom · 发表于 2018-12-19 06:40:03

本帖最后由 wwhcom 于 2018-12-19 06:41 编辑

如果确定只有原料药成分无其他辅料，回收率可用样品直接配制
2专属性看你做的是方法学确认还是验证，如果确认就做下空白如果是验证就做破坏实验

tianqi614 · 发表于 2018-12-19 07:57:25

第三种是加样回收率吧

xiaoxin0818 · 发表于 2018-12-19 08:10:57

化学药含量测定方法的准确度，可在处方空白辅料中加入已知量被测物对照进行；若不能得到辅料全部组分，可向待测制剂中加入已知量被测物对照进行。专属性就是空白确认就可以了

915_雨 · 发表于 2018-12-19 09:14:00

准确度:加样回收，注意样品中量+加入的对照量要在线性范围内。线性范围做宽点，回收率按药典的就行，

专属性验证方式:
1.加辅料
2.加近似结构物质，难
3.破坏试验，是否破坏了谁知道
4.以准确度、线性、精密度综合评价，建议这种，某老美做法，线性成立基本上就可以说明专属性好，一一对应。

gdg661837 · 发表于 2018-12-19 10:14:21

原料药中含量测定，准确度，一般是如下做：
3)在方法中供试品溶液中添加对照品80%，100%，120%，然后计算：（检测实际值-供试品溶液原来浓度）/理论添加量*100%=回收率

以下是我个人观点：
但是，也可以只用对照品进行测定，但不是2）这种方法。
其实3）这种方法，我个人是不够科学的。

hoitkey · 发表于 2018-12-19 10:22:28

1.回收率看药典指导原则，原料药用对照品做就可以了
2.专属原料药需要做破坏试验

gdg661837 · 发表于 2018-12-19 10:23:33

专属性，不用破坏，在杂质对照品可获得的情况下，对于含量测定，试样中可加入杂质或辅料，考察测定结果是否受干扰，并可与未加杂质或辅料的试样比较测定结果。

当然啦，肯定得做空白。

gdg661837 · 发表于 2018-12-19 10:27:33

tuange 发表于 2018-12-19 09:34
只是原料含量不需要做回收率，专属性肯定要全套做

我也这么觉得

山顶洞人 · 发表于 2018-12-19 14:00:17

这个问题搞得我都插不上嘴！得，走了！

gdg661837 · 发表于 2018-12-19 16:11:35

山顶洞人发表于 2018-12-19 14:00
这个问题搞得我都插不上嘴！得，走了！

大神，点评几句

一对虾 · 发表于 2018-12-19 17:05:41

回收率:1，2我觉得是一样的，我是用样品做的，3线性需要做到220%？
专属性:空白无干扰，加杂质对照品看是否有干扰
仅个人看法，不知道对不对

gdg661837 · 发表于 2018-12-20 08:49:45

一对虾发表于 2018-12-19 17:05
回收率:1，2我觉得是一样的，我是用样品做的，3线性需要做到220%？
专属性:空白无干扰，加杂质对照品看是否 ...

不需要220%

一对虾 · 发表于 2018-12-20 09:17:38

gdg661837 发表于 2018-12-20 08:49
不需要220%

但是加样后浓度不是达到220%了吗，不做这个浓度下的线性就直接用外标法的计算公式感觉没有说服力

gdg661837 · 发表于 2018-12-20 10:45:02

一对虾发表于 2018-12-20 09:17
但是加样后浓度不是达到220%了吗，不做这个浓度下的线性就直接用外标法的计算公式感觉没有说服力

样品中量哪有那么多。

一对虾 · 发表于 2018-12-20 12:05:03

gdg661837 发表于 2018-12-20 10:45
样品中量哪有那么多。

额，好吧，我是觉得原料药含量都挺高的

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