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[无菌&限度检查] 水样的微生物限度检查菌落异常

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药徒
发表于 2020-3-31 11:09:23 | 显示全部楼层 |阅读模式

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本帖最后由 绿幽灵 于 2020-3-31 11:19 编辑

之前做纯水的时候,有些点观察结果是0,同系列都四五十,觉得奇怪。这次这个水样2号样这样的菌落形态一开始以为是没有长菌,以前在做纯水的取点的时候也这样判断。后来发现是应该有东西的,迎着光能看到极小的黑点,与空白样不一样。昨天用了体视镜放大看,能明显看出来是有菌落的样子的,有凸起,有反光,拍的照片继续放大能看清楚有些很小的点。
我放大了图片到测一个方格40mm,同比例下一个菌落直径1.5~2mm,滤膜(孔径0.45μm,直径47mm)中心轴上约15个方格,换算后一个菌落直径大约0.1175~0.1567mm,也就是117.5~156.7μm
也曾经猜测是不是培养基均匀度的问题,以前纯水的点有些培养基就其他长得挺好就是有一两个培养基就是这样长不起来。但是这次分别用了购买的成品培养基和自己配置的培养基,样品结果一致,2号样长这种小小的,1号样长一大堆小的和黄色的。
咨询了培养基制造商技术部,说没有遇到过这种情况,但是建议我们还是需要点数的不能当成没有菌;R2A培养基,培养时间5天,没有继续延长培养时间的必要了,再延长培养基就干了。

下一步打算等下一次发现这种情况的时候,直接拿进操作台,无菌操作把滤膜的菌面印在新的培养基上,进行接种后揭下滤膜培养,看这种小菌落直接在培养基上是不是也长不大。

想在这里请教一下各位同行,是否有遇到相同情况? 是不是有些菌的菌落形态就是这么小长不大?还是这样是有差异性?2号样这样要不要菌落计数还是读为0?有什么研究解决思路?请大家畅所欲言,不吝赐教。

1号样肉眼观察

1号样肉眼观察

2号样肉眼观察

2号样肉眼观察

1号样镜下观察

1号样镜下观察

2号样镜下观察

2号样镜下观察
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药徒
发表于 2020-3-31 11:48:12 | 显示全部楼层
有没有可能是滤膜的问题,因为滤头一直被火烧烤,有黑色的点点沾到上面,你们可以用灭菌的纯化水再试验一下 和2号取样点做一下对比。
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药生
发表于 2020-3-31 11:49:08 | 显示全部楼层
肉眼看不出来,没要求一定要算吧。
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药徒
发表于 2020-3-31 11:50:25 | 显示全部楼层
密密麻麻的,吓死我了,纯化水这么多菌?以前偶尔出现过,一般都是被外界污染了
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药徒
 楼主| 发表于 2020-3-31 11:52:56 | 显示全部楼层
小乞丐 发表于 2020-3-31 11:50
密密麻麻的,吓死我了,纯化水这么多菌?以前偶尔出现过,一般都是被外界污染了

这个水样不是纯化水的,也是水样,一样的做法,以前做纯水也有发现这种现象,只是没留照片,这次想着搞清楚这个问题所以拍照拍得比较仔细。
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药徒
 楼主| 发表于 2020-3-31 11:54:04 | 显示全部楼层
制药初学者 发表于 2020-3-31 11:49
肉眼看不出来,没要求一定要算吧。

是不是计数也是需要探讨的,肉眼看不出来,但是放大倍数后能看出来是菌落形态。感觉就是没长起来的菌。
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药徒
 楼主| 发表于 2020-3-31 11:56:28 | 显示全部楼层
dk521 发表于 2020-3-31 11:48
有没有可能是滤膜的问题,因为滤头一直被火烧烤,有黑色的点点沾到上面,你们可以用灭菌的纯化水再试验一下 ...

我们有做空白,空白滤膜上面没有这些点点。空白用的就是灭菌的生理盐水,生理盐水用纯化水配的。
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药徒
发表于 2020-3-31 11:59:44 | 显示全部楼层
绿幽灵 发表于 2020-3-31 11:52
这个水样不是纯化水的,也是水样,一样的做法,以前做纯水也有发现这种现象,只是没留照片,这次想着搞清 ...

最好鉴定下菌落,或者接种培养放大观察
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药徒
发表于 2020-3-31 12:14:15 | 显示全部楼层
绿幽灵 发表于 2020-3-31 11:56
我们有做空白,空白滤膜上面没有这些点点。空白用的就是灭菌的生理盐水,生理盐水用纯化水配的。

划线、分离、鉴定吧
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药徒
 楼主| 发表于 2020-3-31 14:50:25 | 显示全部楼层
dk521 发表于 2020-3-31 12:14
划线、分离、鉴定吧

好的    谢谢建议
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药徒
 楼主| 发表于 2020-3-31 14:50:49 | 显示全部楼层
小乞丐 发表于 2020-3-31 11:59
最好鉴定下菌落,或者接种培养放大观察

好的   谢谢建议
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发表于 2020-3-31 15:38:26 来自手机 | 显示全部楼层
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药徒
 楼主| 发表于 2020-3-31 15:40:47 | 显示全部楼层
顺利呀 发表于 2020-3-31 15:38
支持 谢谢楼主分享

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