紫外分光光度计检测蛋白质含量，稀释倍数计算

小陈1111

药典中检测蛋白质含量使用BCA法第四法　2,2'-联喹啉-4,4'-二羧酸法（BCA法）对照品溶液的制备　除另有规定外，取血清白蛋白（牛）对照品或蛋白质含量测定国家标准品，加水溶解并制成每1ml中含0.8mg的溶液测定法　精密量取对照品溶液0.0ml、0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml（对照品溶液取用量可在本法测定范围内进行适当调整），分别置具塞试管中，各加水至0.5ml，再分别加入铜-BCA试液10.0ml，立即混匀，置37℃水浴中保温30分钟，放冷，照紫外-可见分光光度法（通则0401），立即在562nm的波长处测定吸光度；同时以0号管作为空白。以对照品溶液浓度与其相对应的吸光度计算线性回归方程。另精密量取供试品溶液适量，同法测定。从线性回归方程计算供试品溶液中的蛋白质浓度，并乘以稀释倍数，即得。疑问：1、配置的标准品浓度含量为0.802mg/ml，建立标准曲线时，分别取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml，浓度分别为0.0802、0.1604、0.2406、0.3208、0.401mg/ml，后面补足水分到0.5ml，再加的显色剂10ml，总体积算10.5ml，这个还要进行稀释倍数计算吗？如取0.1ml标准品，0.0802mg除以10.5这样计算建立标准曲线的浓度吗？2、如果后面补足的0.5ml，再加的10ml显色剂，10.5ml这不再进行稀释倍数计算，检测样品时取0.5ml，紫外分光光度检测值为0.12mg/ml,是不是还要除以0.5，最终样品的蛋白质含量为0.24mg/ml,

小陈1111

疑问：
1、配置的标准品浓度含量为0.802mg/ml，建立标准曲线时，分别取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml，浓度分别为0.0802、0.1604、0.2406、0.3208、0.401mg/ml，后面补足水分到0.5ml，再加的显色剂10ml，总体积算10.5ml，这个还要进行稀释倍数计算吗？如取0.1ml标准品，0.0802mg除以10.5这样计算建立标准曲线的浓度吗？
2、如果后面补足的0.5ml，再加的10ml显色剂，10.5ml这不再进行稀释倍数计算，检测样品时取0.5ml，紫外分光光度检测值为0.12mg/ml,是不是还要除以0.5，最终样品的蛋白质含量为0.24mg/ml

安平ysf

是的 这个计算我也有这个疑问 你的这个问题得到解决了吗？