关于抗体的酸碱异构体的探讨

4kshao · 发表于 2016-4-11 15:57:55

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小弟目前在做中试放大，用的细胞株是cho-s，但是在放大到2L、5L、50L放大一致，但是放大到200L时，只有酸碱异构峰发生了改变，细胞培养工艺没有发生变化，请各位大神指点！

strive1988 · 发表于 2016-4-13 16:01:17

哺乳动物细胞培养规模放大有难度，尤其是放大到200L甚至2000L，有时主要工艺参数没有变化，但就是质量有变化，尤其是糖基化/或者你说的酸碱峰。你说细胞培养工艺没有变化，你放大是根据什么放大的？

4kshao · 发表于 2016-4-15 08:47:48

strive1988 发表于 2016-4-13 16:01
哺乳动物细胞培养规模放大有难度，尤其是放大到200L甚至2000L，有时主要工艺参数没有变化，但就是质量有变 ...

转速参照一般的放大标准，且在50L做了几次认证，没问题，其他的溶氧、通气方式，二氧化碳分压、pH值、代谢都没什么问题！

4kshao · 发表于 2016-4-15 08:48:16

strive1988 发表于 2016-4-13 16:01
哺乳动物细胞培养规模放大有难度，尤其是放大到200L甚至2000L，有时主要工艺参数没有变化，但就是质量有变 ...

转速参照一般的放大标准，且在50L做了几次认证，没问题，其他的溶氧、通气方式，二氧化碳分压、pH值、代谢都没什么问题！

strive1988 · 发表于 2016-4-16 09:36:59

4kshao 发表于 2016-4-15 08:48
转速参照一般的放大标准，且在50L做了几次认证，没问题，其他的溶氧、通气方式，二氧化碳分压、pH值、代 ...

额，使用的是一次性反应器还是不锈钢反应器啊，搅拌方式是什么样的。细胞密度，残糖，乳酸，铵离子等生长参数也都是一样的么？不知道你说的200L反应器的酸碱峰与50L反应器的酸碱峰有多大的差别，这个也可以通过工艺调节的，细胞培养很多细节很重要的，可能很细微不易察觉的差别就是原因。

4kshao · 发表于 2016-4-18 08:50:41

strive1988 发表于 2016-4-16 09:36
额，使用的是一次性反应器还是不锈钢反应器啊，搅拌方式是什么样的。细胞密度，残糖，乳酸，铵离子等生长 ...

我们50L、200L全部用的都是一次性的反应器，搅拌方式为双桨机械搅拌，细胞生长曲线表现一致，糖的消耗、乳酸、铵离子代谢基本一致，唯独就是WCX上，酸碱峰发生了改变，我们再怀疑是不是pH对其的影响，后期想检测下反应器的真实pH，直接用二氧化碳分压检测！不知道你能否给点你的意见，哈哈，拜谢了先！

strive1988 · 发表于 2016-4-23 10:47:11

4kshao 发表于 2016-4-18 08:50
我们50L、200L全部用的都是一次性的反应器，搅拌方式为双桨机械搅拌，细胞生长曲线表现一致，糖的消耗、 ...

pH是影响酸碱异构体的重要因素之一，不过按你说的，你的糖耗，乳酸等参数一致，而且pH离线测量一般也是比较准确地，具体情况我也不太清楚不太好说。不过倒是可以测二氧化碳分压，氧分压，看看差异度。

xevodd · 发表于 2016-5-20 00:04:37

看下糖型，脱酰胺比例，赖氨酸变体比例，是否有变

jackieustc · 发表于 2016-6-14 06:56:07

酸碱异构体变怎么个变化，酸性多了还是碱性多了？