小于100cfu/ml菌悬液如何制备

青梅竹马

小于100cfu/ml菌悬液如何制备，请有经验的老师操作细节详细描述一下，求教，万分感谢！

kzr1994

菌悬液在试验前一天稀释好，做3-4个大概适宜稀释度的计数培养，菌悬液冰箱保存。第二天试验前大概点读计数结果，挑选适宜的稀释级别进行试验，同时对选用稀释级别菌悬液再次进行计数培养，确定试验使用菌悬液具体含菌量。

cc5720

思思兰 发表于 2019-6-17 16:32
这个我也看了，但是我有个疑问就是菌悬液梯度稀释后要培养24后计数来确定合适的稀释度，那如果24小时内使 ...

没明白你什么意思，做完后培养24小时后才能使用，24小时以内还没培养好，怎么用呢？

cc5720

大侠虾 发表于 2018-3-6 17:33
购买原始菌种后询问厂家原始菌种含菌量大概是多少，然后开始传代，到三代后根据含菌量做相对应的稀释梯度 ...

请问最后合适的菌悬液放冰箱能保存多久呢？如果过了保质期那就从原始菌直接稀释到合适的稀释度培养还是重新一步一步的培养？

cgycxd

对菌悬液的不同稀释级别分别取1ml浇注培养基，按照相应菌的培养条件培养计数。根据计数的情况就知道小于100cfu/ml的稀释度是哪个。

大侠虾

购买原始菌种后询问厂家原始菌种含菌量大概是多少，然后开始传代，到三代后根据含菌量做相对应的稀释梯度然后培养（比方说菌含量为1.0*10的6次方，我稀释到10的4次方然后取样1ml涂布培养理论上它会长100个左右的菌，低于100个菌的话，那你就用这个稀释梯度10的4次方为菌液、高于100的话那就在对半稀释一次培养理论上就只有50个左右菌了，那你就用这个稀释梯度10的4次方且再对半稀释后的菌为菌液）我是这么操作的，你参考下~  

思思兰

cc5720 发表于 2019-6-4 10:06
请问最后合适的菌悬液放冰箱能保存多久呢？如果过了保质期那就从原始菌直接稀释到合适的稀释度培养还是重 ...

我也想知道这个合适的菌液能保存多长时间

范范艾米

菌悬液若在室温下放置，应 在 2 小时 内使用；若保存在2〜8°C可 在 2 4 小 时 内 使 用 。黑 曲 霉 孢 子 悬 液 可 保 存 在 2〜8°C，在验证过的贮 存期内使用。15版药典上有说菌悬液保存时间。

思思兰

范范艾米 发表于 2019-6-17 16:21
菌悬液若在室温下放置，应 在 2 小时 内使用；若保存在2〜8°C可 在 2 4 小 时 内 使 用 。黑 曲 霉  ...

这个我也看了，但是我有个疑问就是菌悬液梯度稀释后要培养24后计数来确定合适的稀释度，那如果24小时内使用，我计数确定合适稀释度后菌悬液就不能用了，那我不是白做的？

思思兰

cc5720 发表于 2019-6-17 16:44
没明白你什么意思，做完后培养24小时后才能使用，24小时以内还没培养好，怎么用呢？

对，我问的就是这个，还没培养计数完，菌悬液就不能用了，那怎么做下面的实验？我也是来寻求解惑的

范范艾米

这个之前听别人说，这个在做菌悬液之前可以确定稀释梯度。打个比方，就是代数相同，同一批菌种各挖一耳勺培养做浓菌液，做几支。取一支做稀释梯度，在你觉得适宜的梯度各取1ml放入平皿，放入培养基培养。确定它的稀释梯度，就可以确定这几支的稀释倍数。我觉得如果药典没有规定，可以自己做确认，个人理解。

cc5720

思思兰 发表于 2019-6-17 17:35
对，我问的就是这个，还没培养计数完，菌悬液就不能用了，那怎么做下面的实验？我也是来寻求解惑的

我觉得你的操作不对，应该是培养完在计数啊。没培养完应该不能计数的。

思思兰

cc5720 发表于 2019-6-18 09:21
我觉得你的操作不对，应该是培养完在计数啊。没培养完应该不能计数的。

我没说没培养完就计数啊

sunbrust

这个最后咋做的？

sunbrust

思思兰 发表于 2019-6-17 17:35
对，我问的就是这个，还没培养计数完，菌悬液就不能用了，那怎么做下面的实验？我也是来寻求解惑的

请假一下，最后咋做的？

小金库

非常感谢分享。

今晚煮芝麻汤圆

小金库 发表于 2022-7-21 12:45
非常感谢分享。

所以是怎么做