布的清洗消毒的验证

HMJ

血压计臂带是尼龙布的性质，现在FDA要求我公司提供一个臂带清洗消毒验证，要求：医用酒精棉对臂带上的进行擦拭消毒，消毒下降水平要求达到3-lg（10的3次方cfu），接种的阳性菌是：大肠埃希氏和金黄色葡萄球菌，ATCC,目前初步想用薄膜过滤法来验证，现在对尼龙布接种浓度？、消毒之后冲洗下来过滤，冲洗量？有一些疑问，请大神指教，谢谢

cscdy

你也先把你怎么做的拿出来让大家看看啊

闷闷

消毒效率99.9%? 接种个10的5-6次方的菌 应该可以 过滤加大冲洗量 不超过1000ml

HMJ

闷闷 发表于 2018-5-8 16:49
消毒效率99.9%? 接种个10的5-6次方的菌 应该可以 过滤加大冲洗量 不超过1000ml

1.样品处理：取样品用剪刀剪成25cm2，并进行121℃、30分钟高压蒸汽灭菌
2.阴性对照试验
取1组经过121℃、30分钟高压蒸汽灭菌的样品，加入稀释液100ml滤膜过滤，用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，过滤，取出滤膜，正面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基，平行制备2个平皿，阴性对照必须没有微生物生长，如有需调查原因，本次试验无效，需重新试验。
3.供试品试验
取1组经过121℃、30分钟高压蒸汽灭菌的样品，加入0.5ml经过18-24小时培养的适宜浓度的新鲜菌悬液（10的4次方cfu），用一次性无菌涂布棒均匀涂布于样品表面，作用时间10min，再用75%医用酒精棉对样品横向竖向来回擦拭3次，作用时间也是10min，放入250ml烧杯用100ml0.9%无菌氯化钠清洗、震荡，放入无菌滤杯过滤，冲洗清洗震荡3次，每次100ml0.9%无菌氯化钠全部过滤，最好用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，过滤，取出滤膜，正面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基，平行制备2个平皿。
4.阳性对照
取新鲜菌悬液（小于等于100cfu）0.5ml，加入100ml0.9%无菌氯化钠，过滤，用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，过滤，取出滤膜，正面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基，平行制备2个平皿，测定本底菌落数。
，现在的问题第一：就是菌悬液的浓度很难摸出来，每次同样条件培养出来的浓度都不一样，第二：结果的计算，第三：冲洗的方式，方法，试验过程工序复杂，操作比较繁琐，大神们有没有好的建议或者意见

闷闷

1.如果要规定时间和规定的培养基培养、一般10-6/10-7/10-8 会有一个是小于100CFU的这个只能靠以往的经验，还有就是比浊法 没用过你可以查一下；2 计算结果：（本底菌-消毒后菌）/本底菌；3、冲洗的话100ml/次冲洗 多洗几次 消除消毒剂对菌的影响。验证工作是比较繁琐 有是还很可能得不到理想的结果 只有自己慢慢的摸索。

HMJ

闷闷 发表于 2018-5-14 11:07
1.如果要规定时间和规定的培养基培养、一般10-6/10-7/10-8 会有一个是小于100CFU的这个只能靠以往的经验， ...

1.菌液：是不是用单个菌落接种于50ml液体培养基中，培养18-24小时，在稀释10-6/10-7/10-8 ，会有一个是小于100CFU，这里需要接种至多少液体培养基比较合适？
2.微生物杀灭对数：消毒前微生物数量减去消毒后微生物数量，这个计算方法还是不会，方便留个QQ吗