重组胰蛋白酶细胞消化液在细胞培养液中的应用

浦泰生物

以0.25%胰酶（购自G公司，无EDTA）为对照组，采用不同的细胞消化液消化Vero和BHK-21等

贴壁细胞，观察消化结果及转接培养后的细胞形态及增殖情况，见表1，图1-4。

表 1 传代过程中细胞消化情况记录

消化液	Vero细胞消化情况	BHK-21细胞消化情况	24h细胞    生长情况
0.25%对照组胰酶（购自G公司）	消化过程缓慢，细胞收缩不明显，消化7.5min后还存在细胞团，不见贴壁细胞	消化过程缓慢，细胞收缩不明显，部分细胞团漂浮，大部分细胞仍成片贴壁	长满成均匀，致密的单层细胞
0.25%试验组胰酶	消化过程较快，细胞收缩较明显，7.5min后均已经基本分散为极小的细胞团和单个细胞	消化过程较快，细胞收缩明显，最终呈单个细胞	长满成均匀，致密的单层细胞
0.02ETDA-0.25%试验组胰酶	消化过程较快，细胞收缩较明显，7.5min后均已经基本分散为极小的细胞团和单个细胞	消化过程较快，细胞收缩明显，最终呈单个细胞	长满成均匀，致密的单层细胞

图 1 传代过程中BHK-21细胞的消化过程

    对照组    试验组（无EDTA）  试验组（含EDTA）

图 2 传代过程中BHK-21细胞消化后的增殖情况

    对照组    试验组（无EDTA）  试验组（含EDTA）

图 3传代过程中Vero细胞的消化过程

对照组    试验组（无EDTA）  试验组（含EDTA）

图 4 传代过程中Vero细胞消化后的增殖情况

            对照组    试验组（无EDTA）  试验组（含EDTA）

从试验结果可看出，用 0.02% EDTA-0.25%胰酶、0.25%胰酶消化的细胞消化速度优于对照组，

且细胞消化均匀，无细胞团，24h后长满成均匀、致密的单层细胞，细胞形态完整。同时，

Vero和BHK-21等贴壁细胞在不同消化液的消化效果如下表2。

表2 不同消化液消化BHK-21、Vero贴壁细胞效果（n=3）

消化液	传代细胞	平均存活率（%）
0.25%对照组胰酶（购自G公司）	BHK-21	93.53
0.02ETDA-0.25%试验组胰酶	BHK-21	93.47
0.25%试验组胰酶	BHK-21	93.67
0.25%对照组胰酶（购自G 公司）	Vero	94.93
0.02ETDA-0.25%试验组胰酶	Vero	93.63
0.25%试验组胰酶	Vero	94.81

小金库

谢谢楼主的分享

zhaomengwss

感谢楼主分享