【珐成浩鑫杯】单克隆抗体纯化应考虑的因素

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  单克隆抗体纯化工艺应考虑哪些因素？

      单克隆抗体纯化方法的选择，既要考虑单抗体基本特性因素，同时又要考虑单克隆抗体生产宿主的特性因素，综合分析选择单克隆抗体纯化的工艺。

       基于单克隆抗体基本特性选择纯化工艺。

       每个单克隆抗体，其分子量、等电点、疏水性、糖基化、PH值稳定性、溶解度、多聚体复合物的形成等生化性质各不相同。单克隆抗体纯化方法的选择，要基于上述单克隆抗体生化性质因素选择制定纯化工艺。例如：单克隆抗体溶解度因素，有些单克隆抗体在温度低于37℃时溶解度会降低，易结晶，在纯化工艺选择时，应避免冷室操作；单克隆抗体PH值稳定性因素，一般情况下单克隆抗体，在水溶液或一般的缓冲液中都比较稳定，但应避免极端的PH值，如低的PH值会促使蛋白聚集，过高的PH值会促使脱酰胺酶降解单抗，在纯化工艺选择时，应根据单克隆抗体PH值稳定性因素选择纯化工艺，避免极端的PH值溶液。

       基于单克隆抗体生产宿主因素选择纯化工艺

      可供选择的单克隆抗体生产宿主包括直接免疫动物如鼠/兔、杂交瘤细胞、哺乳动物细胞、酵母、转基因动物、转基因植物等。单克隆抗体生产宿主不同，则单克隆抗体生产产生的主要相关杂质也不同，纯化清除工艺的也不相同。如以酵母作为单克隆抗体生产宿主，单克隆抗体生产的主要杂质为宿主细胞蛋白及培养基中蛋白，针对这类杂质，采用中空纤维膜做样品的澄清，之后用离子交换结合疏水层析工艺进行纯化效果比较好；对于以转基因植物作为单克隆抗体生产宿主，单克隆抗体生产的主要杂质为色素、植物细胞杂质蛋白，针对这类杂质，采用亲和层析纯化植物表达抗体效果比较好，对于少量吸附在亲和胶体上的色素，可用分子筛去除。

总之，单克隆抗体纯化工艺的选择，既要考虑单抗体基本生化性质因素，同时又要考虑单克隆抗体生产宿主的特性因素，综合分析选择单克隆抗体纯化的工艺。

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