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[生产制造] 培养基促生长实验失败

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发表于 2024-10-13 07:19:36 来自手机 | 显示全部楼层 |阅读模式

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培养基模拟灌装后的培养基在进行促生长测试时,发现金黄色葡萄球菌未生长,这种一般是什么原因导致的。
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大师
发表于 2024-10-13 08:10:54 | 显示全部楼层
培养基模拟灌装后进行促生长测试时金黄色葡萄球菌未生长可能有以下原因:

一、培养基方面

培养基质量问题:
培养基可能存在配方错误、成分缺失或变质等情况,导致无法支持金黄色葡萄球菌生长。
培养基的制备过程中可能出现了失误,如灭菌过度破坏了营养成分、pH 值调节不准确等。
培养基的选择性:
所用培养基可能对金黄色葡萄球菌具有抑制作用,而非促生长作用。

二、金黄色葡萄球菌方面

菌种问题:
菌种本身可能活力不足、老化或已死亡。
菌种在保存、传代过程中出现了问题,影响了其生长能力。
接种操作问题:
接种量过少,不足以在培养基中生长出明显的菌落。
接种过程中操作不当,导致菌种受损或污染。

三、环境因素

培养条件问题:
温度、湿度、氧气含量等培养条件不适合金黄色葡萄球菌生长。
培养时间不足,金黄色葡萄球菌还未充分生长。
污染问题:
培养基可能被其他微生物污染,这些微生物产生的代谢产物抑制了金黄色葡萄球菌的生长。
培养环境中的杂菌或有害物质干扰了金黄色葡萄球菌的生长。
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药徒
发表于 2024-10-13 12:53:36 来自手机 | 显示全部楼层
从人机料法环分析即可!
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药生
发表于 2024-10-14 08:03:48 | 显示全部楼层
不是操作问题就是培养基问题
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发表于 2024-10-14 08:33:11 | 显示全部楼层
需要更仔细的描述,才好判断
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药徒
发表于 2024-10-14 08:53:22 | 显示全部楼层
先排查原因,后可以再弄些培养基培养看看
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药徒
发表于 2024-10-14 09:30:57 | 显示全部楼层
鬼使神差 发表于 2024-10-13 08:10
培养基模拟灌装后进行促生长测试时金黄色葡萄球菌未生长可能有以下原因:

一、培养基方面

膜拜大佬,加个好友
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药徒
发表于 2024-10-14 10:06:25 | 显示全部楼层
先开启实验室异常调查吧,
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药徒
发表于 2024-10-15 10:51:04 | 显示全部楼层
不是有两组吗?两组都没生长?如果其他菌都生长,就金黄色葡萄球菌没生长,那就要考虑是不是金黄色葡萄球菌菌株的问题了
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药徒
发表于 2024-10-15 13:30:35 | 显示全部楼层
模拟灌装么??有空气不??没空气的话,金黄色葡萄球菌很容易死的,或者长的很小
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药徒
发表于 2024-10-17 14:12:43 | 显示全部楼层
一、操作因素
接种失败:
接种量不足:接种过程中金黄色葡萄球菌的数量可能过少,不足以在培养基上形成可见的菌落。
接种环过热:如果接种环在接种前未充分冷却,可能导致细菌被烫死,从而造成接种失败。
无菌操作不当:
在接种过程中未能严格遵守无菌操作规范,可能导致杂菌污染或目标菌被抑制。
二、培养基因素
培养基错配或不适合:
使用的培养基可能不适合金黄色葡萄球菌的生长。不同的细菌对营养成分的需求不同,因此选择合适的培养基至关重要。
培养基配置过程中可能存在称量错误、添加剂比例错误等问题,导致培养基质量不合格。
培养基成分问题:
过度灭菌可能导致培养基中的某些成分失效,特别是那些不耐高温的成分。
培养基的pH值未正确调整,不同温度下培养基的pH值会发生变化,未正确调配pH值也可能导致细菌不生长。
培养基质量问题:
成品培养基本身可能存在质量问题,如原材料纯度不高、含有抑菌成分或原材料之间配比错误等。
特殊培养基及添加剂未正确存放,如未遮光、冷藏、严格密封保存等,可能导致其失效。
三、菌种因素
菌种老化或退化:
金黄色葡萄球菌如果经过长时间保存或频繁传代,可能导致菌种老化或退化,从而影响其生长能力。
菌种未充分活化:
在进行促生长测试前,金黄色葡萄球菌可能未得到充分活化,导致其生长缓慢或无法生长。
四、环境因素
培养条件不当:
温度、湿度、氧气浓度等培养条件未调整到金黄色葡萄球菌生长的最佳状态,可能导致其生长受阻。
紫外线照射:
如果接种后的培养基暴露在紫外灯下过长时间,紫外线可能杀死细菌,导致无法生长。
五、其他因素
抗菌药物残留:
如果在培养基模拟灌装过程中使用了含有抗菌药物的清洁剂或消毒剂,并且这些物质未能被彻底清除,可能会抑制金黄色葡萄球菌的生长。
解决措施
针对以上可能的原因,可以采取以下措施来解决问题:
仔细检查接种过程,确保接种量足够且接种环在接种前已充分冷却。
加强无菌操作规范,防止杂菌污染。
重新配置培养基并检查其成分和pH值是否正确。
更换新的、质量可靠的培养基进行试验。
对菌种进行复壮处理或重新购买新的菌种进行试验。
调整培养条件至金黄色葡萄球菌生长的最佳状态。
检查并避免紫外线照射对培养基的影响。
确保在培养基模拟灌装过程中使用的清洁剂或消毒剂不含有抗菌药物或已彻底清除。
通过综合分析和排查以上可能的原因,并采取相应的解决措施,通常可以解决金黄色葡萄球菌在培养基上未生长的问题。
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药生
发表于 2024-10-17 16:27:14 | 显示全部楼层
排除法,一一排查
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 楼主| 发表于 2024-10-17 19:56:46 来自手机 | 显示全部楼层
重新对该批次使用的胰酪大豆胨液体培养基配制后灭菌(117℃60min),隔天用该批次使用的金黄色葡萄球菌进行促生长,结果是阳性。
作为对照,还使用新购的胰酪大豆胨液体培养基配制后灭菌,隔天用该批次使用的金黄色葡萄球菌进行促生长,结果也是阳性。
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发表于 2024-10-18 08:40:24 | 显示全部楼层
lance11 发表于 2024-10-17 19:56
重新对该批次使用的胰酪大豆胨液体培养基配制后灭菌(117℃60min),隔天用该批次使用的金黄色葡萄球菌进行 ...

哪家的培养基?
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药徒
发表于 2024-10-18 10:07:37 | 显示全部楼层
鬼使神差 发表于 2024-10-13 08:10
培养基模拟灌装后进行促生长测试时金黄色葡萄球菌未生长可能有以下原因:

一、培养基方面

全面  总结到位
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