阿拉伯胶-葡萄糖和果糖-薄层板变黑

blackvane

大家好：
    按照15版药典，检测阿拉伯胶的“葡萄糖和果糖”项目，结果是硅胶板在喷了显色剂，然后放入烘箱加热后，整个硅胶板都变黑了。.
且后面研究发现，直接将显色剂喷到板上，板在烘箱中加热，板就变黑了。
求助有此经验的同学，问题会出在哪里？
我们自己调查的结果可能是如下几个方面，：
1-        硅胶板质量问题（用了2个品牌的板，国药集团和上海信宜的，都出现了这样的问题，可能性小）；
2-        显色剂有问题（用的都是新开瓶的试剂，可能性小）；
3-        药典的方法有问题，要求用的硅胶G板，是不是应当用不同的板？

附：检验方法
葡萄糖和果糖           取本品0.1g ,置离心管中，加1%三氟乙酸溶液2 m l ,强力振摇使溶解，密塞120°C加热1 小时，离心，小心转移上层液至50ml烧杯中，加水10ml减压蒸发至干. 残渣加水0 .1m l及甲醇0.9ml，离心分离沉淀。如有必要，用醇1ml稀释上层清液。另分别取阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、鼠李糖及木糖对照品各lOmg于lm l水中，用甲醇稀释至10ml，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以1 .6%磷酸二氢钠溶液-正丁醇-丙酮（10:4 0: 50)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以对甲氧基苯甲醛溶液（取对甲氧基苯甲醛0.5ml，加冰醋酸10m丨，甲醇8 5 m l,琉酸5ml，摇匀，即得）至恰好湿润，立即在110C加热10分钟，放冷，立即检视，对照品溶液应显示的5个淸晰分离的斑点，从下到上的顺序依次为半乳糖(灰绿色或绿色）、葡萄糖(灰色）、阿拉伯糖(黄绿色）、木糖(绿灰色或黄灰色）、鼠李糖(黄绿色）。供试品色谱中，在与半乳糖和阿拉伯糖对照品色谱相应的位置之间，不得显灰色或灰绿色斑点。

八戒

硅胶板加显色剂加热后颜色变黑正常啊，很多荧光下不显示的物质都是需要通过显色剂来显示的

blackvane

八戒 发表于 2015-10-13 11:39
硅胶板加显色剂加热后颜色变黑正常啊，很多荧光下不显示的物质都是需要通过显色剂来显示的

可是变黑了，完全看不清楚爬板的点在哪里；
试验现象完全看不到，也没法做判断了，这怎么办？

blackvane

请教，自己顶一下！！

13687846600

加热时间太长，加热一下顺着余温至变色就可以了

blackvane

补充一个现象：
薄层板在110℃活化了1小时，没有发现变黑的问题。

zhenglanlan12

你的硅胶板是玻璃面的还是铝面的？我以前做过别的，用玻璃面的就黑，用铝面的就不黑 我们用的是默克的板。还有你们前边处理是用什么加热的？离心能分层吗？我离心出来没有上清液。。。你们离心多久。反正我是还没做到你们那步，我前边处理都没做出来呢  求教。。。

zhenglanlan12

你们用的减压蒸干还是常压蒸干？

zhenglanlan12

反正觉得这个薄层好难啊