关于细菌内毒素检测过程中的疑惑之处

永恒12

如题，在进行细菌内毒素检测时，采用的凝胶法，按照我的理解：1.在制备阳性液时，用BET水稀释内毒素工作标准品，最终使用的阳性液浓度为2λ，这样在最终反应时就是0.1mL阳性液和0.1mL的鲎试剂反应；
2.供试品阳性对照液应该是用供试液稀释内毒素工作标准品，使最终浓度成为2λ的供试品阳性液；这样在最终反应时就是0.1mL供试品阳性液和0.1mL的鲎试剂反应；
3.供试品直接取用，这样在最终反应时就是0.1mL供试液和0.1mL的鲎试剂反应；
但是，这样是不是就是说供试液反应时被稀释了一倍呢？因为鲎试剂是用的BET水溶解的嘛。各位，你们觉得正确的操作方式应该是什么？还望有大佬不吝赐教。

小小牛1002

鲎试剂的说明书让这么用，就一直这么用了

火舞精灵

鲎试剂溶解的过程不应考虑为稀释过程，按照说明书复溶后的鲎试剂为使用时的试剂，液体状态仅作为实验时的试剂。

火舞精灵

阳性对照采用2入的浓度是因为凝胶法有50%~200%的误差，2入可以确保阳性对照一定是阳性。

李jup5hii6

不要自己理解，不然还要你自己写验证文件

千帆弑M

说明你理解的还不到位，可能是刚接触到这个行业。熟悉了你就理解了

清翎

我们做干扰实验的时候，会用到2入、入、0.5入、0.25入，通常中间两个浓度也会有凝固的现象，如上楼有人说到 凝胶法存在一定的误差。若是用0.5入的鲎试剂则 0.25有可能均会产生凝胶现象。以下限为考虑，可能就能理解为什么这样操作。

阿西达卡

清翎 发表于 2023-4-26 08:52
我们做干扰实验的时候，会用到2入、入、0.5入、0.25入，通常中间两个浓度也会有凝固的现象，如上楼有人说到 ...

他说的不是阳性的问题，他的意思是样品被稀释了一倍的问题

阿西达卡

火舞精灵 发表于 2023-4-25 09:35
阳性对照采用2入的浓度是因为凝胶法有50%~200%的误差，2入可以确保阳性对照一定是阳性。

按你这个说法，样品更应该用大一倍浓度做了

清翎

阿西达卡 发表于 2023-7-21 09:36
他说的不是阳性的问题，他的意思是样品被稀释了一倍的问题

我意思是样品稀释了一倍，按干扰实验来说，还是可以达到凝结效果的

阿西达卡

清翎 发表于 2023-7-21 10:54
我意思是样品稀释了一倍，按干扰实验来说，还是可以达到凝结效果的

干扰实验的浓度一般比最小有效浓度都大吧

火舞精灵

阿西达卡 发表于 2023-7-21 09:40
按你这个说法，样品更应该用大一倍浓度做了

所以一般内控标准会收严一倍