细菌内毒素凝胶法的稀释倍数问题

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question：问一下友友们，平常做内毒素检查，按照最大稀释倍数范围内去做稀释吗？一般做多少倍呢？背景：因为我们是做细胞制品的，本身待检样品就是清洗细胞的上清液了，所以我基本不做稀释，使用原液进行凝胶法检验（目前从未出错）。
9月份同事做了一个中国食品药品检定研究院的内毒素的测量审核，最后结果是不满意，电话询问说是阳性样品检成阴性了。排除掉温育时长、取出时振摇等等各种因素后，我第一反应是她的稀释倍数做太高了，她却很坚持说自己计算了稀释倍数没问题最后不了了之。结合她连鲎试剂的灵敏度测定值都不会计算，并且平常也不做微生物检验工作，我不太信任她的说辞，但是她工龄很大，我不好反驳她。

wzzz2008

阳性样品，和样品的稀释倍数没关系。
这种情况，有两个可能，
一是试剂有问题，也就是说，你们的试剂，可能失效了。
二是，阳性对照的稀释倍数算错了，阳性的浓度，稀释到检测限度以下了。
人家不会算，就更好办了，让他描述一下，阳性对照的稀释步骤，你再算一个稀释倍数就好。他不会算，应该不会做错了但跟你说个对的出来。

小孔同志

只要低于最大有效稀释倍数都可以，具体是多少倍需要根据你们的验证资料来，还有你说第一反应是他们稀释倍数太大了，我没有听懂，稀释本身就是降低干扰，稀释倍数大了反而结果不合格？

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小孔同志 发表于 2023-11-27 13:20
只要低于最大有效稀释倍数都可以，具体是多少倍需要根据你们的验证资料来，还有你说第一反应是他们稀释倍数 ...

因为如果是无菌操作不达标，那更可能是引入外源内毒素，导致阴性检成阳性，但她是阳性检成阴性，所以我认为可能是稀释过多，内毒素含量降低，已经达不到可检出的限度了